Chimiothèques de complexes du technétium et du rhénium ciblant l’intégrine alphaVbéta3 : développement de traceurs pour la détection précoce de la néoangiogenèse tumorale

par Marie Aufort

Thèse de doctorat en Sciences biologiques. Biochimie

Sous la direction de Christophe Dugave.


  • Résumé

    Les intégrines sont des protéines membranaires hétérodimériques impliquées dans l'adhésion et la migration cellulaire. Elles sont notamment surexprimées lors de la néoangiogenèse tumorale. Une dizaine d'entre elles reconnaît un motif peptidique RGD structuré. Des analogues de cette séquence peuvent être utilisés pour la détection précoce de tumeurs et de métastases. Nous avons entrepris de développer de nouveaux traceurs, marqués au 99mTc, spécifiques de l'intégrine alphaVβ3. Ne disposant d'aucun modèle prédictif fiable de la structure des complexes d'oxotechnétium au début de ce projet, nous avons préféré une approche combinatoire et avons choisi d’identifier les traceurs efficaces par un criblage in vivo. Cette méthode permet de prendre en compte au plus tôt les aspects de biodistribution et de pharmacocinétique. Les traceurs ont été obtenus selon deux stratégies : cyclisation d’analogues linéaires de RGD ou assemblage combinatoire de motifs indépendants par coordination du cœur oxotechnétium par le motif NS2+S. La stabilité des traceurs a été testée en présence de glutathion et dans le plasma. Une première évaluation in vitro sur intégrine purifiée a montré que l’un des peptides RGD, cyclisé par le rhénium, se lie spécifiquement àalphaVβ3. Un modèle tumoral (tumeur U87-MG, souris nude) a été validé au laboratoire et une méthode d'analyse du criblage in vivo a été mise au point à l'aide de composés modèles. Il s'avère que les données de biodistribution et le pourcentage d'activité retrouvé dans la tumeur sont encourageants pour les complexes cycliques, bien que l'identification des traceurs efficaces soit rendue difficile par leur instabilité dans les conditions d’analyse.

  • Titre traduit

    Libraries of RGD analogs, labeled through ReO3+ or TcO3+ coordination, targeting alphaVbeta3 integrin : development of tracers for the early detection of tumor neoangiogenesis


  • Résumé

    Integrins form a family of heterodimeric integral glycoproteins which play a central role in cell-cell adhesion and cell-matrix interactions. In particular, they are overexpressed during tumor neoangiogenesis. About 10 of them recognize a structured RGD (Arg-Gly-Asp) sequence. Analogs of this sequence can be used for the early detection of tumors and metastases. We developed new tracers, labeled with 99mTc, for the molecular imaging of alphaVβ3 integrin. Until recently, there was no reliable ab initio structure prediction of complex molecules containing Re and Tc chelates. Therefore, we preferred a combinatorial approach to develop potential ligands of alphaVβ3 integrin and we attempted to identify efficient tracers by in vivo screening. This method would account for biodistribution and pharmacokinetics properties in the early steps of the study. Tracers were obtained according two strategies: i) cyclization of linear RGD analogs; ii) combinatorial assembling of independent modules through metal core coordination by the well-known NS2+S motif. After synthesis and labeling, the stability of the tracers was investigated in presence of glutathione and in murine plasma. In vitro screening on purified integrin showed that a cyclic rhenium coordinate binds specifically alphaVβ3. A tumor model (U87-MG tumor on nude mice) was validated in the laboratory and a method was developed to analyze in vivo experiments. Biodistribution data and percentage of activity found in tumors are encouraging for cyclic compounds though identification of efficient tracers is difficult due to their instability in the conditions of analyses.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (311 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 293-311

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  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 0g ORSAY(2008)204
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