Le gène suppresseur de tumeur p53 : un déterminant clef dans le contrôle de la lyse tumorale spécifique induite par le granzyme B

par Franck Meslin

Thèse de doctorat en Structure, fonction et ingéniérie des protéines

Sous la direction de Salem Chouaib et de Maryam Diarra-Mehrpour.

Soutenue en 2008

à Paris 7 .


  • Résumé

    L'élucidation du conflit entre la tumeur et le système immunitaire de l'hôte suscite un grand intérêt dans le domaine de l'immunologie des tumeurs. Le principal objectif de ces projets de recherche est d'appréhender lee mécanismes moléculaires responsables de la résistance des tumeurs aux agents cytotoxiques et de développer de nouvelles approches permettant le contournement de cette résistance tumorale. Le rôle de la protéine suppresseur de tumeur p53 dans l'apoptose induite par les agents clefs de la réponse immunitaire adaptative, les lymphocytes T CD8+ (CTL), reste encore à élucider. Nous avons pu déterminer dans une première étude l'implication de la protéine suppresseur de tumeur p53 dans la lyse des cellules de mélanome par des lymphocytes T cytotoxiques autologues. Afin d'affiner notre étude, nous avons focalisé notre attention sur un acteur déterminant de la lyse des cellules cibles par les lymphocytes T cytotoxiques : le granzyme B (GrB). Nos observations suggèrent pour la première fois que la voie perforine/granzymes et, plus particulièrement l'endocytose du GrB, contribue à l'induction d'un signal de stress conduisant à l'accumulation de p53. Dans notre volonté de réaliser une analyse pluridisciplinaire nous nous sommes également intéressés dans la continuité de cette thématique de résistance à l'apoptose à un proto-oncogène non-conventionnel, la protéine prion (PrPc). La PrPc semble en effet être impliquée dans la résistance à l'apoptose des cellules tumorales. L'analyse de la sensibilité des cellules transfectées à l'apoptose induite par TRAIL, nous ont permis de montrer que le KO de PrPc suffit à rendre sensible les cellules tumorales mammaires à TRAIL.

  • Titre traduit

    The tumor suppressor gene p53 : a key factor in the control of specific granzyme B mediated lysis


  • Résumé

    We fïrst investigated the involvement of p53 in cytotoxic T-lymphocyte (CTL)-induced tumor target cell killing mediated by the granzymes pathway. Experimental data indicated that conjugate formed between LT12 and Tl resulted in rapid accumulation of p53 and its activation in Tl target cells. Cytotoxic assay using recombinant granzyme B (GrB) showed that this serine protease is the predominant factor inducing such accumulation. We have for the first time demonstrated that p53 is an important determinant in granzyme B-induced apoptosis. This study supports p53 induction following CTL-induced stress in target cells. These fîndings provide new insight into a potential role of p53 as a component involved in the dynamic régulation of the major pathway of CTL-mediated cell death and may have therapeutic implications. The tumoral resistance engaged multiple factors. We next investigated the relationship between the resistance to the pro-apoptotic action of TRAIL and the cellular prion protein (PrPc) function, using human TRAIL-resistant breast adenocarcinoma cell line. Down-regulation of PrPc by small interfering RNA increased the sensitivity of adriamycin- and TRAIL-resistant cells to TRAIL, but not to epirubicin/adriamycin. TRAIL-mediated apoptosis in PrPc knocked-down cells was associated with caspase processing, Bid cleavage and Mcl-1 degradation. Bcl-2 expression was substantially decreased after PrPc knock-down bijt the levels of Bcl-XL and Mcl-1 were not affected. Better understanding of the molecular insights into regulation of cytotoxic agents and its relationship with apoptotic related proteins will certainly provide new targets for therapeutic immune interventions.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (308 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 950 réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2008) 213
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 10447
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