De l'importance de la caractérisation des différentes isoformes de RFC gamma des cellules NK pour l'optimisation fonctionnelle des anticorps monoclonaux à usage thérapeutique

par Charles-Antoine Dutertre

Thèse de doctorat en Immunologie

Sous la direction de Jean-Luc Teillaud.

Soutenue en 2008

à Paris 7 .


  • Résumé

    De gros efforts ont été faits pour optimiser les propriétés cytotoxiques des anticorps monoclonaux (AcM) à usage thérapeutique, en particulier leur capacité d'engagement du RFcγIIIA (CD16) activateur exprimé à la surface des cellules NK capables d'induire une cytotoxicité cellulaire dépendante d'anticorps (ADCC). La première partie de nos travaux a visé à déterminer l'expression de RFcγll par les cellules NK, ainsi que leur rôle dans le contrôle de l'ADCC, et nous a permis de mettre en évidence une nouvelle sous-population de cellules NK CD56dim/CD3ˉ/NKp46⁺/RFcγlllAbright/RFcγllbright exprimant fortement le RFcγllB inhibiteur. Nous avons montré que les cellules NK RFcγllBbright, détectée chez tous les donneurs sains, présentent un profil d'expression de récepteurs NK (NKR) différent de celui des cellules NK RFcγll'°/ˉ(exprimant majoritairement le RFcγIIC activateur), ainsi qu'une dégranulation réduite au cours de leur activation RFcγ-dépendante. La seconde partie de nos travaux a permis de démontrer qu'un AcM anti-CD20 développé par le Laboratoire français du Fractionnement et des Biotechnologies, l'EMAB-6, présente in vitro une activité cytotoxique contre les cellules de leucémie lymphoïde chronique B (LLC-B) beaucoup plus élevée que celle du rituximab, grâce a sa capacité de fixation au RFcγlllA beaucoup plus importante que le rituximab. Nos études ont permis de confirmer qu'un faible taux de fucosylation de l'AcM EMAB-6 était responsable de cette propriété et qu'un meilleur engagement du RFcylllA donne un avantage cytotoxique d'autant plus important à cet AcM par rapport au rituximab que la densité de molécules CD20 à la surface des cellules cibles était plus faible.

  • Titre traduit

    Characterization of the different Fc Gamma receptor isoforms expressed by human nk cells for a better functional optimisation of therapeutic monoclonal antibodies


  • Résumé

    Important efforts have been devoted to the optimization of cytotoxic therapeutic monoclonal antibodies (mAb), in particular to the improvement of their capacity to engage the activating RFcγIIIA (CD16) expressed on NK cells that are capable of antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC). In the present work, we examined the expression of FcγRIl by human NK cells, as well as their role in the control of ADCC, which made it possible to define a novel NK cell subpopulation, CD56dim/CD3ˉ/NKp46⁺/RFcγlllAbright/RFcγllbright that strongly expresses inhibitory FcyRIlB. We showed that FcYRMBbright NK cells, detected in all the donors tested, exhibit an expression profile of NK cell receptors (NKR) different from that of NK RFcγll'°/ˉ cells (that predominantly express the activating FcγRIIC), as well as a reduced degranulation following FcγR-dependent activation. The second part of our work allowed the demonstration that an anti-CD20 EMAB-6 antibody developed by the Laboratoire français du Fractionnement et des Biotechnologies, presents a much higher cytotoxic activity against B cell chronic lymphocytic leukemia (B-CLL) cells in vitro than rituximab, a marketed anti-CD20 therapeutic mAb. This increased activity was linked to a much higher binding capacity to FcyRIIIA as compared to its non-optimized counterpart or to rituximab. Our studies also confirmed that the low fucose level of the EMAB-6 mAb is essential to its increased FcγRIIIA binding and efficacy. Finally, the better cytotoxic activity of this antibody as compared to rituximab was found even increased when the density of CD20 on target cells was lower.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (295 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 382 réf.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2008) 132
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 9758
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