Rôles de hMunc13-4 et Rab27a dans la maturation et l'exocytose des granules cytotoxiques

par Mickaël Menager

Thèse de doctorat en Génétique

Sous la direction de Geneviève de Saint Basile.

Soutenue en 2008

à Paris 7 .


  • Résumé

    L'étude de différentes pathologies du système immunitaire associée à l'apparition d'un syndrome hémophagocytaire nous a permis de mettre en évidence un rôle déterminant de la fonction cytotoxique des lymphocytes T CD8+ dans le maintien de l'homéostasie lymphocytaire. Dans pratiquement toutes les pathologies génétiquement caractérisées qui évoluent vers l'apparition d'un syndrome hémophagocytaire, un effecteur de la voie cytotoxique dépendante des granules est mis en cause. C'est le cas en particulier des défauts en protéines hMunc13-4 et Rab27a, impliquées dans l'apparition d'une lymphohistiocytose familiale de type 3 et d'un syndrome de Griscelli. Ce travail permet de montrer que la fonction cytotoxique des lymphocytes T cytotoxiques et des cellules Natural Killer nécessite la coopération entre deux types d'organelles : les granules cytotoxiques contenant les effecteurs de la lyse (granzymes, Perforine. . ) et des vésicules dîtes « d'exocytose » de type endosomal, véhiculant les effecteurs de Pexocytose (Rab27a et hMunc13-4). Ces résultats suggèrent l'existence d'un phénomène de maturation rapide des granules lytiques, induit par la formation de la synapse immunologique. Nous mettons également en évidence une nouvelle isoforme de Slp2a, Slp2a-hem, interagissant avec la forme active de Rab27a et impliquée dans les processus d'arrimage des vésicules au niveau de la synapse immunologique. Nous montrons l'existence d'une interaction entre hMunc13-4 et Rab27a dans les cellules cytotoxiques, qui coordonnerait les étapes d'arrimage et d'amorçage de la fusion des granules cytotoxiques au niveau de la synapse immunologique.

  • Titre traduit

    Secretory cytotoxic granule maturation and exocytosis require the effector proteins hMunc13-4 and Rab27a


  • Résumé

    Several human inherited disorders are characterized by a functional impairment of the granule dependent cytotoxic pathway. Molecular characterization of these human conditions allowed to identify critical effectors of this cytotoxic pathway and highlighted the essential role of the cytotoxic activity in lymphocyte homeostasis. According to our previous work, the protein hMunc13-4 and Rab27a are one of these effectors which anomalies lead to Hemophagocytic Syndrom, in the context of Familial Hemophagocytic Lymphohistiocytosis type 3 and Griscelli Syndrome type 2. Here we show that the granule-dependent cytotoxic fonction of cytotoxic T lymphocytes and Natural Killer cells requires the cooperation of two types of organelles, the lytic granule and an endosomal-like "exocytic vesicle". In a first step of the secretory pathway, hMunc!3-4, independently of Rab27a, mediates assembly of recycling and late endosomal structures to constitute a pool of endosomal vesicles engaged into the regulated exocytic pathway. Cytotoxic-target cell recognition induces a rapid polarization of both types of organelles, which overlap and likely fuse at the cell-cell contact. In addition, hMunc13-4 has been identified as one of the effectors of Rab27a, potentially Connecting granule docking to granule priming at the Immunological Synapse. We have also shown that Rab27a recruits a previously unknown hematopoietic form of Slp2a (Slp2a-hem) on vesicular structures in peripheral CTLs. Following CTL-target cell conjugate formation, the Slp2a-hem/Rab27a complex colocalizes with perforin-containing granules at the immunological synapse, where it binds to the plasma membrane through its C2 domains.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (186 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 366 réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2008) 102
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