Etude phénotypique et génotypique de patients hémophiles A modérés ou atténués avec anomalie qualitative : rapports structure / fonction du facteur VIII

Phenotypic and genotypic profiles of patients with qualitative moderate/mild hemophilia A Structure/Function interactions of coagulation factor VIII

• Auteur / Autrice : Marc Trossaërt
• Direction : Edith Fressinaud
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine. Biologie Médecine Santé. Hématologie Biologique
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Nantes
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale chimie biologie (Nantes....-2008)
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Nantes Université. Pôle SantéUFR Médecine et Techniques Médicales (Nantes)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Facteur antihémophilique A

Hémophilie

Résumé

Nous avons évalué l'activité du facteur VIII de la coagulation (FVIII:C) en utilisant 2 techniques différentes (méthode chronométrique en 1 temps et méthode chromogénique) chez 307 patients hémophiles A modérés/atténués issus de 173 familles. Il existe une discordance entre les 2 méthodes chez 36 patients appartenant à 17 (10%) familles. Dans 14 de ces familles où l'anomalie moléculaire a pu être recherchée, une mutation a été mise en évidence : 5 nouvelles mutations du gène du FVIII sont identifiées : p. Pro264Leu, p. His281Asn, p. Ile369Thr, p. Phe1785Leu et p. Phe2127Ser. Nous rapportons également les résultats de l’analyse génétique de 130 autres familles : 29 nouvelles mutations sont décrites en étudiant les conséquences moléculaires de ces substitutions d’acides aminés grâce à une modélisation 3D de la protéine du FVIII. Dans 2 familles (X et Y) avec des résultats de FVIII:C discordants selon la technique, nous étudié l'intérêt de la thrombinographie (TG) pour évaluer le risque hémorragique. Soixante et un patients hémophiles sans discordance dans les résultats de FVIII:C et 15 sujets normaux servirent de contrôles. La famille X ne présentait aucun antécédent hémorragique contrairement à la famille Y. Pour les membres de la famille X, les résultats étaient normaux ; ceux de la famille Y se sont comparables à ceux des patients hémophiles A sans discordance biologique. Ces résultats suggèrent que la TG peut avoir une pertinence clinique chez les patients hémophiles modérés/atténués, particulièrement en cas de discordance des taux de FVIII:C en fonction de la méthode.

We measured factor VIII activity (FVIII:C) using 2 methods (one-stage chronometric and chromogenic assays) in 307 patients with moderate/mild hemophilia belonging to 173 families. Thirty-six patients from 17 (10%) families exhibited discrepancy between the two assays. Five novel FVIII mutations associated with discrepancy were described: p. Pro264Leu, p. His281Asn, p. Ile369Thr, p. Phe1785Leu and p. Phe2127Ser. Furthermore, we report on the spectrum of mutations in 130 other families with moderate/mild hemophilia A. Twenty-eight novel missense mutations and one single-residue deletion are described. We studied their putative involvement at known FVIII functional sites, their conservation status with cross-species FVIII proteins, and their spatial position within the FVIII 3D conformation. In 2 of these families (X and Y) with discrepant FVIII:C results, we examined whether thrombography (TG) could provide a better evaluation of the haemostatic status of these patients. Sixty-one moderate/mild haemophiliacs without discrepancy and 15 healthy subjects served as controls. Family X had no serious bleedings by contrast to family Y. For members of family X, the TG parameters were normal whereas for those of family Y they were diminished, similar to results of moderate/mild haemophiliacs without discrepancy. These results suggest that the haemostatic phenotype assessed by TG may be clinically relevant in moderate/mild hemophilic patients with discrepant FVIII:C results.