Immobilisation de biomolécules par la technique du transfert de macromolécules dans le PDMS pour le développement de biopuces

Biomolecule immobilisation using the “macromolecules to PDMS transfer” technique for biochip developments

• Auteur / Autrice : Kévin Heyries
• Direction : Loïc Blum, Christophe A. Marquette
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie
• Date : Soutenance en 2008
• Etablissement(s) : Lyon 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Spectrométrie de masse de désorption de plasmas

Chimiluminescence

Résumé

Une technique innovante a été développée, basée sur l’immobilisation directe de spots de protéines et d’ADN à la surface du PDMS lors de la polymérisation de l’élastomère. La technique présentée, baptisée « transfert de macromolécules dans le PDMS », a permis de produire des surfaces de PDMS fonctionnalisées contenant des protéines ou des séquences d’ADN accessibles pour la reconnaissance moléculaire. En mettant à profit les propriétés de moulage du PDMS, deux systèmes microfluidiques ont ensuite été conçus et utilisés pour la détection chimiluminescente d’anticorps en solution. Finalement, une extension des possibilités offertes par cette approche a été démontrée en remplaçant du PDMS par une solution de poly(méthylméthacrylate) (PMMA) polymérisable rapidement pour la production de biopuces en PMMA

An innovative technology based on the direct immobilization of proteins and DNA spots during the PDMS polymerization was developed during this work. The introduced technology was named «macromolecules to PDMS transfer» and allowed the fabrication of functionalized PDMS surfaces containing active immobilized DNA sequences and proteins for molecular recognition. Then, taking advantage the available PDMS properties, two microfluidics systems were designed and used for the chemiluminescent detection of proteins interactions. Finally, an extension of the possibilities offered by this approach was demonstrated through the replacement of PDMS with a solution of poly(methylmethacrylate) (PMMA) polymerizable to produce PMMA biochips.