Effets des facteurs transcriptionnels hc-Krox et NF-kappaB sur la régulation de l'expression du collagène de type I dans des fibroblastes dermiques humains sains et slcérodermiques

par Gallic Beauchef

Thèse de doctorat en Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie

Sous la direction de Philippe Galéra.

Soutenue en 2008

à Caen .


  • Résumé

    Dans cette étude, nous avons recherché les effets des facteurs trans hc-Krox (« human c-Krox »), Sp1 (« Specific Protein-1 »), Sp3 et NF-kappaB (« Nuclear Factor-kappaB ») sur l’expression du collagène I dans des fibroblastes dermiques humains normaux d’adultes (FNA) et sclérodermiques (FS). Ainsi, nous avons démontré que les facteurs Sp1/3 et hc-Krox, trois facteurs à doigts à zinc, activent l’expression du collagène I au niveau protéique et au niveau des taux d’ARNm COL1A1 et COL1A2, dans des FNA et des FS. De plus, ces facteurs augmentent l’activité transcriptionnelle du gène COL1A1 par l’intermédiaire de la région promotrice proximale de 112 pb dans les deux souches fibroblastiques, via des séquences cis caractérisées fonctionnellement. A l’inverse, la sous-unité p65 de NF-kappaB inhibe l’activité transcriptionnelle de COL1A1 chez les FNA et les FS, via la même région promotrice ne comportant pourtant pas de séquence consensus pour ce facteur. A cet égard, nous avons montré que pour exercer ses effets, le facteur NF-kappaB interagissait in vitro et in vivo avec Sp1, Sp3 et hc-Krox, et était de ce fait recruté sur le promoteur COL1A1. Des études complémentaires dans des FNA et des FS ont montré que l’expression du collagène I est corrélée avec l’activité de liaison de hc-Krox sur le promoteur COL1A1. Nous avons également réalisé des expériences préliminaires sur le vieillissement cutané d’individus de tranches d’âges différentes qui ont montré que les expressions du collagène I et du facteur activateur hc-Krox diminuaient avec l’âge ; à l’inverse, l’activité de liaison de NF-kappaB semble augmenter au cours du vieillissement

  • Titre traduit

    Effects of transcriptional factors hc-Krox and nf-kappab on the regulation of type I collagen expression in human normal and scleroderma fibroblasts.


  • Résumé

    In this study, we have investigated the roles of transcription factors hc-Krox (human c-Krox), Sp1 (Specific Protein-1), Sp3 and NF-kappaB (Nuclear Factor-kappaB) on type I collagen expression by normal human (NHF) and scleroderma (SF) fibroblasts. Our results show that the three zinc-finger proteins hc-Krox, Sp1 and Sp3 are strong activators of type I collagen expression by increasing type I collagen protein synthesis and steady-state levels of COL1A1 and COL1A2 mRNA in NHF and SF. Moreover, they up-regulate COL1A1 gene transcriptional activity through a region localized in the 112 bp proximal promoter in which we have identified the functional cis-responsive elements. We also demonstrated that NF-kappaB down-regulates COL1A1 by a transcriptional control and through the same region by which the zinc-finger mediate their effects. Despite no existing consensus sequence for NF-kappaB in the COL1A1 proximal promoter, we find that all the trans factors, including NF-kappaB, bind to the COL1A1 promoter in chromatin immunoprecipitation assays. Furthermore, Sp1/3/hc-Krox are necessary to mediate the inhibitory effect of NF-kB on COL1A1 in NHF and SF since they are found to interact each others. Moreover, complementary experiments performed in NHF and SF demonstrated that type I collagen synthesis is correlated with the c-Krox DNA binding activity on the COL1A1 promoter. Besides, we realized preliminary experiments showing that type I collagen and c-Krox expression decrease during aging, although NF-kappaB binding activity seems to increase.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (V-206 f.)
  • Annexes : Bibliogr. f.176-201

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  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TCAS-2008-44
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