Identification and characterisation of new members of pectin methylesterase/invertase inhibitor family in tomato (Solanum lypersicum)

par Ida Barbara Reca

Thèse de doctorat en Nutrition, aspects cellulaires et moléculaires

Sous la direction de Daniela Bellincampi et de Thierry Giardina.

Soutenue en 2008

à Aix-Marseille 3 en cotutelle avec l'Università degli studi La Sapienza (Rome) .

  • Titre traduit

    Identification et caractérisation de deux nouveaux membres de la famille des inhibiteurs de pectine méthylesterase/invertase chez la tomate (Solanum lycopersion)


  • Résumé

    Les pectine méthylesterases et les invertases sont des enzymes clefs du métabolisme des glucides chez les plantes dont l'activité est modulée par des inhibiteurs appartenant à la même famille (PF04043) Dans ce travail, deux protéines de tomate appartenant à cette famille ont été identifiées et caractérisées Par RT-PCR quantitative, il a été montré que SolyPMEl est principalement exprimé dans le fruit rouge. Après expression en système hétérologue, purification et caractérisation, il s'agit du «PME binding protein» sans aucune activité mhibitnce. La purification de la protéine naturelle, par immuno-affinité, montre la formation d'un complexe avec la PME de tomate confirmant nos résultats précédents. SolyCIF a été exprimé dans Pichia postons et caractérisée d'un point de vue biochimique. SolyCIF est un inhibiteur d'invertase localise dans la paroi cellulaire et qui interagit in vitro avec l'invertase vacuolaire de tomate (TIV-1).


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    Pectin methylesterase and invertase are key enzymes in plant carbohydrate metabolism. Inhibitors of both enzymes constitute a structural family (INH/PMEI); nevertheless the respective target enzymes are structurally unrelated. In this thesis two new members of this family (SolyCIF & SolyPMEl) have been identified and characterised in tomato. SolyPMEl was found to be mainly expressed in red fruit. All attempts to produce active recombinant SolyPMEl protein for biochemical characterization appear to be unsuccessful. The isolation of both natural SolyPMEl and PME1 by immuno-afBnity, indicate that SolyPMEIs is in vivo engaged in the formation of a complex with endogenous PMEs. SolyCIF was expressed in two heterologous systems and functionally characterized. SolyCIF is a cell-wall proteinaceous invertase inhibitor which interacts in vitro with a vacuolar enzyme, TIV1. TIV1 is a monomer composed of several fragments that have to be tightly associated for enzymatic activity to occur.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (127 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 105-127

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  • Bibliothèque : Université d'Aix-Marseille (Marseille. Saint-Jérôme). Service commun de la documentation. Bibliothèque de sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 200068754
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