2009-03-19T23:59:59Z
2020-11-12T03:16:13Z
Le complexe membranaire Tol d'Escherichia coli : un modèle pour l'étude de l'organisation fonctionnelle d'un moteur moléculaire bactérien
2008
2008-01-01
Le système protéique Tol-Pal est conservé chez les bactéries à Gram négatif. Chaque mutant tol ou pal provoque une déstabilisation de la membrane externe (ME). Les protéines TolA-Q-R forment un complexe de membrane interne (MI) ; Pal ancrée dans la ME interagit avec le peptidoglycane et la protéine périplasmique TolB. L’interaction entre TolA et Pal dépend de TolQ-R et de la force proton-motrice (fpm). Les protéines TolA-Q-R relient ainsi MI, ME et le peptidoglycane. Le but de ce projet est de comprendre l’organisation des segments transmembranaires (sTM) de TolQ-R et le mécanisme énergétique. Les interactions entre sTM ont été analysées ainsi que les résidus impliqués dans le passage d’ions. Nous avons montré que le domaine C-terminal de TolR est dynamique en réponse à la fpm. Nous avons entrepris une mutagénèse systématique de chacun des résidus des sTM. Les résultats obtenus ont permis de dresser un modèle dynamique de l’organisation des sTM du complexe TolQ-R.
The Tol-Pal system is well conserved in Gram negative bacteria. Each of the tol- pal mutant exhibits outer membrane (OM) defects. The TolQ-R-A proteins form an inner membrane (IM) complex; Pal anchored in the OM interacts with the peptidoglycan and the periplasmic protein TolB. The TolA-Pal interaction depends on TolQ-R and on the proton motive force (pmf). The TolQ-R-A proteins may form a molecular motor using the pmf to link IM, OM and the peptidoglycan. The aim of this work is to understand the organisation of the IM TolQ-R proteins and the utilisation of pmf. Using mutagenesis approaches, we defined helix organization and key residues of the putative ion channel. We demonstrated movements of the C-terminus of TolR dependent on the pmf. To define complex organisation and conformational changes of the transmembrane segments (TMs), we performed a cysteine scanning mutagenesis. Our results suggest a dynamic model of the TolQ-R TMs organisation.
Cystéine
Colicines
Escherichia coli
Protéines membranaires
Goemaere, Emilie
Lloubès, Roland
Aix-Marseille 2
Ecole Doctorale Sciences de la Vie et de la Santé (Marseille)