SHIP1 et activation plaquettaire : rôle critique dans l'organisation du cytosquelette et la croissance du thrombus

SHIP1 and activation plaquettaire : critical role in the organization of the cytosquelette and the growth of the thrombus

• Auteur / Autrice : Sonia Séverin
• Direction : Monique Plantavid
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Physiopathologie, des approches expérimentales aux nouvelles thérapeutiques
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

Mots clés contrôlés

Thrombose

Hémostase

Facteur d'activation des plaquettes

Cytosquelette

Activation plaquettaire

Mots clés libres

Plaquettes

Phosphoinositides

Ship1

Cytosquelette

Hémostase et thrombose

Résumé

Les plaquettes sanguines jouent un rôle majeur dans le maintien de l'intégrité vasculaire en participant à la formation du clou hémostatique. Cependant, en plus de leur rôle physiologique, elles sont des acteurs essentiels dans des pathologies graves comme les thromboses artérielles. Dans le but d'améliorer les traitements anti-thrombotiques actuels, la détermination de nouvelles cibles thérapeutiques nécessite une meilleure connaissance des mécanismes moléculaires qui sous-tendent l'activation plaquettaire. La phosphoinositide 5-phosphatase, SHIP1 (Src homology 2 domain-containing inositol 5-phosphatase 1) joue un rôle majeur dans la régulation fine des taux respectifs de deux D3-phosphoinositides, le phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate et le phosphatidylinositol 3,4-bisphosphate, dont les rôles précis restent encore mal connus dans les plaquettes. En plus de son activité catalytique 5-phosphatase, SHIP1 possède plusieurs domaines d'interactions protéiques, lui permettant de se comporter comme une véritable protéine adaptatrice. Afin de caractériser précisément le rôle de SHIP1 dans la régulation des différentes fonctions plaquettaires, nous avons étudié en détail le phénotype des plaquettes de souris déficientes en SHIP1 in vitro et in vivo. Notre étude met en exergue un rôle critique de SHIP1 dans la formation d'agrégats plaquettaires in vitro et dans la croissance des thrombi in vivo, nécessaires pour une hémostase normale. De façon intéressante, SHIP1 est impliquée dans les processus de contraction plaquettaire permettant des contacts étroits entre les plaquettes, nécessaires à la croissance et l'organisation du thrombus ainsi qu'à la rétraction du clou plaquettaire. Une étude plus moléculaire nous a permis ensuite de montrer que SHIP1 joue un rôle critique dans l'organisation du cytosquelette d'actine et la contraction du microtubule en régulant les taux de D3-phosphoinositides via son activité 5-phosphatase, mais aussi en régulant l'activation de la voie Rho/Rho-kinase en agissant comme une protéine adaptatrice. Cette étude montre un rôle essentiel de SHIP1 dans les processus d'activation plaquettaire in vitro et in vivo, contrairement à son rôle bien établi dans la régulation négative de nombreuses cellules hématopoïétiques comme les mastocytes et les lymphocytes B.

Platelets are critical for normal haemostasis. Their deregulation can lead to bleeding or to arterial thrombosis, a primary cause of heart attack and ischemic stroke. SHIP1 (Src homology 2 domain-containing inositol 5-phosphatase 1) is a 5-phosphatase capable of dephosphorylating the phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate second messenger, producing phosphatidylinositol 3,4-bisphosphate. SHIP1 plays a critical role in the control of the level of these two lipids in platelets but its role in the regulation of platelet functions remains largely unknown. In addition to its phosphatase activity, SHIP1 can participate in signal transduction mechanisms as a docking protein, due to multiple protein-protein interaction domains. To gain insight into the role of this protein in the regulation of platelet functions, we investigated in detail the phenotype of SHIP1-deficient platelets in vitro and in vivo. Our data demonstrate a critical role for SHIP1 in the formation of normal platelet aggregates in vitro and most importantly in normal haemostasis and thrombus growth in vivo. Interestingly, SHIP1 plays an important role in platelet contractility leading to close cell-cell contacts, required in thrombus organization and fibrin clot retraction. . .