Rôle des récepteurs P2Y1,P2Y4 et P2Y12 dans un modèle d'angiogenèse in vivo chez la souris et rôle du récepteur P2Y1 dans la fonction de la cellule endothéliale

par Nicolas Lantz

Thèse de doctorat en Pharmacologie

Sous la direction de Christian Gachet.

Soutenue en 2007

à l'Université Louis Pasteur (Strasbourg) .


  • Résumé

    En plus de leur rôle dans l’hémostase et la thrombose, les nucléotides extracellulaires interviennent dans différents processus physiologiques et physio-pathologiques tels que la prolifération cellulaire et la modulation de l’apoptose, le contrôle du tonus vasculaire et la réponse inflammatoire, en agissant sur les cellules endothéliales, les cellules musculaires lisses et les leucocytes. L’inflammation, la prolifération cellulaire et les plaquettes sanguines tiennent une place importante dans l’angiogenèse ce qui suggère que ces nucléotides pourraient jouer un rôle dans ce processus. Les récepteurs P2Y aux nucléotides sont exprimés sur la plupart des cellules qui participent aux étapes de la formation des vaisseaux sanguins, à savoir les plaquettes sanguines, les cellules endothéliales, les cellules musculaires lisses et les leucocytes, et leur rôle dans l’angiogenèse a été ainsi envisagé. L’objectif de ce travail a été d’étudier le rôle des récepteurs P2 des nucléotides dans l’angiogenèse. Pour cela, nous avons d’abord mis au point un modèle d’étude in vivo chez la souris. Nous avons aussi été amenés, au cours de ce travail, à établir des lignées immortalisées de cellules endothéliales de souris. Les principaux résultats de ces travaux sont que, parmi les récepteurs étudiés, le récepteur P2Y4 semble avoir un rôle important dans l’angiogenèse. Concernant le récepteur P2Y1, son rôle n’a pas pu être mis en évidence dans le modèle in vivo. En revanche, dans les cellules endothéliales immortalisées en culture, il semble participer à la régulation de la prolifération. Enfin, pour étudier le rôle du récepteur P2Y12, nous avons utilisé le clopidogrel, l’inhibiteur sélectif de ce récepteur, ainsi que son énantiomère inactif. Les deux molécules ayant le même impact dans notre modèle in vivo, à savoir la formation de zones hémorragiques et une diminution du nombre de vaisseaux formés, nous ne pouvons pas attribuer cet effet à l’inhibition du récepteur P2Y12. En conclusion, notre travail a permis de mettre à disposition du laboratoire, deux modèles d’étude : un modèle d’angiogenèse in vivo et un modèle de culture de cellules endothéliales immortalisées. Concernant les récepteurs P2, seul le récepteur P2Y4 semble jouer un rôle dans l’angiogenèse. Des expériences complémentaires permettront d’indiquer l’importance du rôle d’autres récepteurs P2Y, comme les récepteurs P2Y2 et P2Y6, ainsi que les récepteurs P2X, dans la formation des vaisseaux sanguins. Leur identification à la surface des cellules endothéliales et des autres cellules participant à l’angiogenèse, permettra non seulement d’étudier leurs fonctions dans la régulation de ces cellules, mais aussi d’envisager leur rôle dans des pathologies dépendantes de l’angiogenèse.

  • Titre traduit

    Role of the P2Y1,P2Y4 and P2Y12 receptor in a mouse in vivo angiogenesis model and role of the P2Y1 receptor in the endothelial cell function


  • Résumé

    In addition to their role in haemostasis and thrombosis, extracellular nucleotides regulate various physiological and physiopathological processes such as the cellular proliferation and the modulation of apoptosis, the control of vascular tone and inflammation, by acting on endothelial cells, smooth muscle cells and leucocytes. Inflammation, cellular proliferation and blood platelets hold an important place in angiogenesis suggesting that nucleotides could play a role in this process. Extracellular nucleotides receptors, the P2Y receptors, are expressed on the majority of the cells involved in the blood vessels formation, for example the blood platelets, endothelial cells, smooth muscle cells and leucocytes, and their role in angiogenesis was thus considered. The aim of this work was to study the role of the extracellular nucleotides P2 receptors in angiogenesis. First, we developed an in vivo mouse model of angiogenesis then we established immortalized mouse endothelial cell lines. The major results of this work are that, among the receptors studied, the P2Y4 receptor seems to have an important role in angiogenesis. Concerning the P2Y1 receptor, its role could not be highlighted in the in vivo model. On the other hand, in the immortalized endothelial cells in culture, this receptor seems to play a role in the control of the proliferation. Lastly, to study the role of the P2Y12 receptor, we used the clopidogrel, the selective inhibitor of this receptor and also its inactive enantiomer. These two molecules having the same impact in our in vivo model, the formation of hemorrhagic zones and a reduction in the number of new vessels formed, we cannot allot this effect to the P2Y12 receptor inhibition. In conclusion, thanks to this work, the laboratory has now two models of study: an in vivo model of angiogenesis and a model of culture of immortalized endothelial cells. Concerning the P2 receptors, only the P2Y4 receptor seems to be important in angiogenesis. Additional experiments are required to highlight the importance of the role of other P2Y receptors, like the P2Y2 and P2Y6 receptors, as well as the P2X receptors, in the formation of blood vessels. Their identification on the surface of endothelial cells and other cells involved in angiogenesis will not only make it possible to study their functions in the regulation of these cells, but also to consider their role in pathologies dependent on angiogenesis.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (181 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 163-178

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Blaise Pascal.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.2007;5384
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