Studying the role of the precursor of mitochondrial lysyl-tRNA synthetase in the targeting of a cytosolic tRNA-Lys in the mitochondria of S. Cerevisiae

par Petr Kamenskiy

Thèse de doctorat en Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie

Sous la direction de Ivan Tarassov et de Igor Krasheninnikov.

Soutenue en 2007

à l'Université Louis Pasteur (Strasbourg) en cotutelle avec Moscou - Russie .

  • Titre traduit

    Etude du rôle du précurseur de la lysyl-ARNt synthétase mitochondriale dans l'adressage d'ARNt lysine cytoplasmique dans les mitochondries de levure S. Cerevisiae


  • Résumé

    Chez S. Cerevisiae, l'ARNtLys CUU (tRK1) codé par l'ADN nucléaire, est adressé dans la mitochondrie. La mitochondrie contient également tRK3, codé par le génome mitochondrial supposé de suffire à la traduction mitochondriale. Ceci pose la question sur la fonction de tRK1 importé dans la traduction organellaire. L'import de tRK1 implique la participation des facteurs protéiques dont le précurseur de lysyl-ARNt synthétase mitochondriale (preMsk1p) et l'enolase (Eno2p). Les travaux de thèse avaient deux objectifs: (a) étudier le mécanisme d'interaction entre tRK1 et preMsk1p; (b) exploiter ces connaissances pour mettre au point un test in vivo permettant de vérifier si tRK1 serait impliqué dans la traduction mitochondriale. Il a été démontré que: (i) interaction de l'ARNt-Lys (tRK1) avec le précurseur de la lysyl-ARNt synthétase mitochondriale preMsk1p est indispensable pour l'import de l'ARN dans mitochondrie; (ii) formation du complexe tRK1/preMsk1p est facilité par la présence de enolase (Eno2p). (iii) interaction de l'ARNt importé avec preMsk1p est différente de celle avec la lysyl-ARNt synthétase cytosolique. Nous avions ensuite démontré que seul le domaine N-terminal de la pre-MSK1 serait capable de diriger l'import de tRK1. Cette découverte a été exploité pour mettre au point le système génétique permettant étudier la fonction de l'ARNt importé. L'inhibition de l'import de tRK1 qui résulte du remplacement du gène MSK1 par celui de son orthologue ayant le domaine N-terminal réduit, a pour effet une inhibition de traduction de codons AAG à la température élevée. Ceci est la première démonstration directe du rôle de tRK1 importé dans la traduction mitochondriale.


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Informations

  • Détails : 1 vol. (Pagination multiple)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 58-69

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Blaise Pascal.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.2007;5321
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