Elastokines et angiogenése : rôle de la MT1-MMP et signalisation intracellulaire mediée par S-GAL

par Abdelaziz Fahem

Thèse de doctorat en Pharmacie. Biochimie. Biologie moléculaire

Sous la direction de Moncef Guenounou et de Georges Bellon.

Soutenue en 2007

à Reims .


  • Résumé

    La @néoangiogenèse est un des processus essentiel à la progression tumorale et la dissémination métastatique et met en jeu l’expression de métalloprotéinases matricielles pouvant dégrader la matrice extracellulaire et générer des fragments doués d’activités biologiques comme les élastokines, issues de la protéolyse de l’élastine. Par des méthodes in vivo et in vitro, nous montrons que les peptides issus de la dégradation de l'élastine et contenant la séquence VGVAPG étaient capables d’induire la néoangiogenèse. L’utilisation d’inhibiteurs nous a permis de démontrer que la MT1-MMP était la principale enzyme impliquée dans l’angiogenèse induite par les peptides d’élastine. Nous avons confirmé son rôle en développant une technique d’interférence par l’ARN visant à invalider son expression de façon stable et transitoire. Afin de compléter notre étude, les voies de signalisations induites par la fixation des peptides d’élastine sur S-Gal ont été ensuite étudiées. Tout d’abord, nous avons montré que les peptides d’élastine stimulent de façon concentration- et temps-dépendant la production de monoxyde d’azote (NO) par les cellules endothéliales. L’utilisation d’inhibiteurs de PI3-kinase, de Akt et de NO synthase nous a permis ensuite de montrer l’implication de la voie PI3Kinase/Akt/eNOS sur la production de NO et l’expression de MT1-MMP et de proMMP-2. Nous démontrons ainsi que les peptides d’élastine sont capables d’induire l’angiogenèse via l’expression et l’activation de la MT1-MMP. Le mécanisme met en jeu 2 voies de signalisation qui agissent en synergie : la voie PI3Kinase/Akt/eNOS et la voie GCs/Raf / MEK1/2 / Erk1/2 conduisant à l’induction de l’expression de la MT1-MMP.

  • Titre traduit

    Elastokines and angiogenesesis : role of membrane type 1 metalloproteinase-1 (MT METALLOPRTOEINASE-1 (MT1-MMP) AND -MMP) and intracellular signalisation involving spliced galactoisidase (S-GAL) : zeng


  • Résumé

    Neoangiogenesis is an essence process in the tumoral progression and metastatic dissemination, and involved matrix metalloproteinase which can degrade the extracellular matrix and generate fragments with biological effects, the Matrikines. Among them, the elastokines, resulting from the proteolysis of elastin, can amplify tumoral invasion. Using in vivo and in vitro methods, we demonstrated that peptides from elastin (EDP) degradation and containing the peptides sequence VGVAPG were able to induce neoangiogenesis. The use of specific inhibitors enabled us to demonstrate that MT1-MMP was the main enzyme implied during the angiogenesis induced by elastin peptides. We confirmed its role by developing the technique of interference by small RNA (RNAi) directed against MT1-MMP expression. In order to complete our study, the signal transduction pathway induced by the fixation of elastin peptides on their receptor S-GAL was studied. Firstly, we showed that EDP induce nitric oxide production in a time- and concentration-dependent manner. We further show that EDP-mediated membrane-type I matrix metalloproteinase expression, at both the mRNA and protein levels, involves PI3-kinase/Akt/NOS and nitric oxide/cGMP/MAP kinase/Erk1,2 pathways in human microvascular endothelial cell-1 line. EDP mediated a time- and -concentration-dependent increase of cGMP that suggested a link between nitric oxide and membrane-type I matrix metalloproteinase expression. This was validated by the use of a nitric oxide donor (DEA-NOate) and a cGMP analog (8-bromo-cGMP). Inversely, the cGMP analog, mimicked the effect of both kappa elastin and nitric oxide donor in a concentration- and time-dependent manner.

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Informations

  • Détails : 1 vol.(218 f.)
  • Annexes : Bibliogr. f.186-218

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  • Bibliothèque : Université de Reims Champagne-Ardenne. Bibliothèque universitaire. Section Santé.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : SATHP07202
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 7530
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