Effets de siRNA anti MMP-2 et d'inhibiteurs de récepteurs aux leucotriènes sur l'hyperplasie intimale post-angioplastie chez le lapin hypercholestérolémique

Effects of siRNA and inhibitors of leukotrienes receptors on intimal hyperplasia after angiooplasty in hypercholesterolemic rabbits

• Auteur / Autrice : Hanna Hlawaty
• Direction : Didier Letourneur
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Génie Biologique et Médical
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Paris 13

Mots clés

Mots clés contrôlés

Thérapie génique

Transfection

Résumé

Le premier chapitre porte sur une stratégie de thérapie génique basée sur le siRNA L’application de siRNA en présence des lipides est une solution prometteuse aux problèmes posés par les méthodes virales. Cependant il est nécessaire d’augmenter l’efficacité de transfection dans les cellules musculaires lisses (CML) in vivo. Dans les artères saines les CML sécrètent la métalloprotéase 2 (MMP-2) de façon constitutive. L’angioplastie par ballonnet provoque l’augmentation de la MMP-2, la migration des CML et l’hyperplasie intimale. Le but de cette partie de thèse était d’appliquer le siRNA contre la MMP-2 (MMP-2-siRNA) dans les CML in vitro et in vivo dans les artères carotidiennes chez le lapin hypercholestérolémique avec hyperplasie intimale. Nous avons montré que le transfert de MMP-2-siRNA in vitro dans les CML, provoque l’inhibition d’expression et d’activité de la MMP-2, et l’inhibition de la migration des CML. Nous avons ensuite montré le transfert local de MMP-2-siRNA in vivo dans l’artère carotidienne. Cette étude montre pour la première fois l’application intraluminale de siRNA in vivo et une réduction d’expression et d’activité de MMP-2 de la paroi artérielle en d’hyperplasie intimale. Le deuxième chapitre est consacré à l’étude de la thérapie antileucotriènes B4 (LTB4) dans le même modèle animal avec présence de stent. Les études in vitro montrent que LTB4 induit la migration des CML. L’analyse ex vivo sur les artères mammaires humaines confirme que LTB4 provoque l’augmentation de la sécrétion de MMP-2. L’effet d’application d’un antagoniste du récepteur BLT a montré l’inhibition d’hyperplasie intimale. Nous reportons également les résultats sur la salive humaine. L’analyse de taux de biomarquers comme lysozyme, LTB4, prostaglandine 2, MMP-9, et MMP-2 a montré que la salive est un échantillon biologique où les marqueurs d’inflammation dans les maladies cardiovasculaires sont faciles à détecter et à étudier.