Régulation de la dynamique microtubulaire : implication de la tubuline GTP et de protéines associées aux microtubules

Regulation of microtubules' dynamic instability : role of GTP-bound tubulin and of microtubule associated proteins

• Auteur / Autrice : Mélanie Quesnoit
• Direction : Christian Poüs, Franck Perez
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pharmacie
• Date : Soutenance en 2007
• Etablissement(s) : Paris 11
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté de pharmacie (Châtenay-Malabry, Hauts-de-Seine)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Microtubules

Tubulines

Kinésines

Mots clés libres

Microtubules

Instabilité dynamique

Tubuline GTP

Clipr-59

Clip-170

Kinésine conventionnelle

Résumé

Les microtubules (MTs) sont un des composants clés du cytosquelette, dont la dynamique est indispensable à la fonction. Dans ce projet, nous cherchons à aborder sous plusieurs angles la régulation de la dynamique microtubulaire, liée au comportement de la tubuline elle-même ou par l'intermédiaire de protéines associées aux MTs. Nous avons construit un outil dans le but d'avancer dans la caractérisation de l'importance de l'hydrolyse du GTP par la tubuline pour la stabilisation du polymère. Cet outil est un anticorps recombinant qui permet de détecter la tubuline liée au GTP et nous a conduit à émettre des hypothèses quant aux mécanismes intrinsèques de régulation de la dynamique des MTs. Nous avons de plus étudié le rôle de protéines liées aux microtubules et avons montré que l'une (CLIP170) en association avec un moteur moléculaire, est indispensable à la mise en place du réseau microtubulaire alors que l'autre (CLIPR59) ralentit in vivo la croissance des MTs.

Microtubules (MTs) are highly dynamic protein polymers essential for intracellular organization. In the work presented here we have studied different aspects of the mechanisms regulating dynamic instability of MTs. We have selected and characterised an antibody recognizing GTP-bound tubulin and the use of this tool has led us to propose a new model for the intrinsic mechanisms regulating dynamic instability of MTs. We also studied the influence of MT associated proteins and found that the molecular motor Kinesin-1 and the +end tracking protein CLIP-170 cooperate to build the interphase network whereas another protein of the CLIP family, CLIPR-59, preferentially binds unpolymerised tubulin and slows down MT growth in vivo.