Etude de l'effet des gangliosides extraits à partir de tumeurs de mélanome humain sur les cellules dendritiquese

par Karim Bennaceur

Thèse de doctorat en Biologie et pharmacologie cutanées

Sous la direction de Josette Peguet.

Soutenue en 2007

à Paris 7 .


  • Résumé

    L'échappement tumoral est lié à de multiples facteurs et notamment à la libération par les cellules tumorales de facteurs solubles capables d'inhiber la fonction des cellules dendritiques. Parmi ces facteurs ont été incriminées différentes cytokines dont VEGF, IL-6, M-CSF et plus récemment, les gangliosides. Ces derniers sont des glycosphingolipides, constituants ubiquitaires des membranes cellulaires. Leur composition est altérée dans les cellules tumorales. L'objectif de ce travail a été premièrement, de tester l'effet des gangliosides GM3 et GD3, extraits de tumeurs de mélanome humain, sur la maturation phénotypique et fonctionnelle des cellules de Langerhans (CL) épidermiques humaines, première barrière immunitaire à la prolifération tumorale du mélanome. Les résultats obtenus montrent un effet immunosuppresseur des gangliosides de mélanome GM3 et GD3 sur les CL. En effet, ces gangliosides altèrent le phénotype des CL, inhibent leur fonction allostimulante ainsi que leur capacité de migration. Par ailleur, on a montré aussi que les gangliosides GM3 et GD3 induisent l'apoptose des CL indépendamment de l'altération phénotypiques. Dans une autre approche, nous avons complété les résultats montrant un effet apoptotique des gangliosides de mélanome GM3 et GD3 sur les cellules dendritiques générés in vitro à partir de monocytes en analysant les mécanismes impliqués dans ce processus. A cet effet, nous avons utilisé différents inhibiteurs enzymatiques. Les résultats obtenus montrent que l'apoptose induite par GM3 et GD3 était caspase-dépendante et ROS indépendante. Les inhibiteurs de la sphingomyelinase neutre ne réversent pas l'apoptose contrairement à la désipramtne, inhibiteur de la sphtngomyelinase acide, qui empêche l'apoptose uniquement avec le ganglioside GM3. Par ailleurs, l'apoptose induite par GM3 et non par GD3 est totalement empêchée par la L-cycloserine, cependant la myriocine et la fumonisine FB1 qui sont impliquées dans la synthèse de novo des céramides n'ont aucun effet. D'autres part l'addition de la N-oleoylethanolamine (NOE), sphingosine 1- phosphate (S1P) et le ceramide 1-phosphate (C1P) qui contrebalancent l'effet des céramides, empêchent partiellement ou complètement l'apoptose induite par GM3 et GD3 suggérant que les céramides sont impliqués dans le processus apoptotique des PC.

  • Titre traduit

    Effect of melanoma gangliosides GM3 and GD3 on dendritic cells


  • Résumé

    Tumor escape is linked to multiple mechanisms, notably to the liberation, by tumour cells, of soluble factors that inhibit the function of dendritic cells (DC). Among these factors were incriminated different cytokines of which VEGF, IT-6, M-CSF and recently, the gangliosides. Gangliosides are ubiquitous, membrane-associated, glycosphingolipids, the composition and production of which is altered in many tumour cells. The objective of this work was first, to test the effect of the gangliosides GM3 and GD3 purified from human melanoma tumors, on phonotypical maturation and functional of human epidermal Langerhans cells (CL), first immune barrier against melanoma proliferation. The obtained results show an immunosuppressive effect of melanoma gangliosides on the CL. In fact, GM3 and GD3 gangliosides impair LC phenotype, inhibit their functions as well as their migration capacity. Besides, we showed also that melanoma gangliosides induce LC apoptosis independently of phonotypical alteration. In another approaches, we have completed the results showing an apoptotic effect of melanoma gangliosides GM3 and GD3 on the dendritic cells generated in vitro from monocytes while analyzing the implied mechanisms in this process. To this effect, we used different enzymatic inhibitors. The obtained results show that the apoptose induced by GM3 and GD3 was caspase-dependante and independent to ROS production. The inhibitors of neutral sphingomyelinase did not abrogate the apoptose in contrast to desipramine, which is an inhibitor of the acid sphingomyelinase, that abrogate DC apoptosis only with the ganglioside GM3. Furthermore, DC apoptosis induced by GM3 and no by GD3 is totally prevented by the l-cycloserine, nevertheless the myriocine and the fumonisine FB1 that are implied also in the novo céramides synthesis have no effect. On the other hand the addition of the n-oleoylethanolamine (NOE), sphingosine 1-phosphates to (S1P) and the ceramide 1-phosphates (C1P) that counterbalance the effect of the ceramides, prevent partially or completely DC apoptosis induced by GM3 and GD3 suggesting that the ceramides are implied in the apoptotic process of the PC.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (128 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 275 réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2007) 127
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.