Hematopoietic and structuring process of the fetal spleen

par Guillaume Desanti

Thèse de doctorat en Immunologie

Sous la direction de Rachel Golub.

Soutenue en 2007

à Paris 7 .

  • Titre traduit

    Processus hématopoïetique et de structuration de la rate foetale


  • Résumé

    Chez la souris, l'ébauche de la rate foetale apparaît à jour embryonnaire 12,5 et contient des progéniteurs myéloides et érythrocytaires. À ce stade, la circulation sanguine est déjà établie et participe à la diversification du « pool » de cellules hématopoïétiques. Au cours de la vie foetale, les cellules hématopoïétiques de la rate prolifèrent et se différencient. Jusqu'à présent, le développement de la rate, son rôle sur la constitution du système hématopoïétique et les mécanismes qui participent à sa structuration ont été peu étudiés. Au cours de ma thèse, j'ai isolé les cellules stromales CD34 et CD34+ de la rate foetale qui pourraient contribuer activement au recrutement des cellules hématopoiétiques. J'ai étudié le contenu hématopoiétique de la rate foetale à différents stades de développement. J'ai caractérisé par des essais in vitro et in vivo une population CD4'nt qui se compose de progéniteurs T, NK, B et myéloides. Ces progéniteurs se différencieraient in situ et participeraient à l'activité hématopoiétique de la rate foetale. J'ai séparé ces progéniteurs en fonction de leur expression du récepteur Flt3 et du transgène RAG2-GFP et j'ai démontré que certains d'entre eux sont capables de se différencier en cellules inductrices des tissus lymphoïdes (ITL). Les ITL jouent un rôle majeur dans la génération des organes lymphoïdes. Afin d'évaluer la fonction des ITL dans la rate foetale, j'ai étudié leur positionnement et montré leur regroupement autour des vaisseaux sanguins. Grâce à un modèle de greffes spléniques, j'ai mis en évidence que les cellules B et les ITL occupent les mêmes régions. Ces résultats suggèrent que la position des futurs follicules lymphoïdes spléniques sont pré-établis par la régionalisation des ITL dans la rate foetale. Afin de déterminer les propriétés hématopoïétiques de l'environnement de la rate foetale, j'ai participé à l'établissement de 10 lignées de cellules stromales de rate foetales et étudié leurs capacités à soutenir la différenciation lymphoïde et myéloïde. Toutes ces lignées soutiennent l'engagement et la différentiation myéloïdes mais n'ont pas la même capacité à soutenir le développement lymphoïde. Cette diversité serait caractéristique de différentes niches de cellules stromales qui composent la rate foetale. Ces niches représenteraient des structures précoces des pulpes rouge et blanche.


  • Résumé

    Mouse splenic anlagen appears at embryonic day 12. 5 (E12. 5) and contains erythroid and myeloid progenitors. At this stage, blood circulation is established and contributes to the hematopoietic pool diversification. During fetal life, the hematopoietic cells of the spleen proliferate and differentiate. Few studies have described the development of the spleen, the mechanisms that mediate the apparition of its structure and its role in the hematopoietic System constitution. During my thesis, I have isolated the fetal spleen CD34" and CD34+ stromal cell subsets that could actively contribute to the recruitment of hematopoietic cells. I have studied the fetal spleen hematopoietic content at different stages of development. I have characterized by in vitro and in vivo assays a CD4'm population that is composed of T, NK, B and myeloid progenitors. These progenitors could differentiate in situ and participate to the hematopoietic activity of the fetal spleen. I have further isolated these progenitors by considering their expression of Flt3 and RAG2-GFP transgene and demonstrated that some are able to give rise to the lymphoid tissue inducer (LTi) cells. These LTi cells play a major role in the lymphoid organ generation. To evaluate the LTi cell function in the fetal spleen, I have assessed their localization and shown their gathering around the blood vessels. Using spleen graft strategy, I have shown that LTi cells co-localize with B lymphocytes. These results suggest that the position of the future splenic lymphoid follicles is pre-established by LTi cells regionalization in the fetal spleen. To study the hematopoietic capacities of the fetal spleen environment, I have participated to the establishment of ten different fetal spleen stromal cell lines (FeSS) and determine their capacities to support the myeloid and lymphoid differentiation. All the FeSS promote the myeloid commitment and differentiation despite their heterogeneous ability to support the lymphoid development. This diversity could be related to the different niches of stromal cells that compose the fetal spleen. These different niches could be representative of the early red or white pulp structures.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (126 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 274 réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2007) 093
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.