Microscopie à force atomique de protéines membranaires : application à l'étude de membranes photosynthétiques et à la membrane externe de la mitochondrie : développement de l'AFM à deux chambres

par Rui Pedro de Sousa Vieira Gonçalves

Thèse de doctorat en Sciences de la vie

Sous la direction de Simon Scheuring.

Soutenue en 2007

à Paris 6 .


  • Résumé

    La microscopie à force atomique (AFM) a été utilisée pour étudier différents systèmes biologiques. Une nouvelle application de l'AFM a été mise au point pour étudier des membranes non supportées. L'AFM a permis l'étude du système photosynthétique bactérien. Ainsi j'ai étudié l'insertion des capteurs de lumière de type 2 dans des bicouches lipidiques de différentes compositions (Gonçalves et al. , 2005b). Mon attention s'est ensuite porte��e sur les membranes natives, champ dans lequel l'équipe a une quasi-exclusivité des compétences au niveau mondial. Ainsi le système photosynthétique a pu être étudié sur deux souches bactériennes: Phaeospirillum molischianum (Gonçalves et al. , 2005a) et Rhodopseudomonas palustris (Scheuring et al. , 2006), approfondissant nos connaissances sur ce système, ubiquitaire sur Terre, et ces bactéries, qui ont un intérêt croissant pour les milieux industriels. Portant l'étude de membranes natives plus loin, j'ai étudié les membranes externes de mitochondries et ainsi, j'ai pu étudier in situ le canal ionique voltage dОpendant et son assemblage supramoléculaire (Gonçalves et al. , 2007). Dans un souci de développement technologique, un nouveau système a été développé. Celui-ci a en effet permis d'étudier des membranes non supportées, séparant deux compartiments aqueux, dont la composition est modulable. Ce système permettra donc de coupler les études fonctionnelles de protéines activables par des gradients entre les compartiments, aux études structurales permises par l'AFM à haute résolution. Nous avons démontré la faisabilité de telles expériences en appliquant notre système à l'étude des couches S de Corynebacterium glutamicum ainsi qu'à la bactériorhodopsine (Gonçalves et al. , 2006).

  • Titre traduit

    Atomic force microscopy of membrane proteins : study of photosynthetic membranes and the mitochondrial outer membrane : developpement of the two-chambers AFM


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Informations

  • Détails : 1 vol. (81 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 74-81. 149 réf. bibliogr.

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  • Bibliothèque : Université Pierre et Marie Curie. Bibliothèque Universitaire Pierre et Marie Curie. Section Biologie-Chimie-Physique Recherche.
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  • Cote : T Paris 6 2007 696
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