Immobilisation de la trypsine sur un support de polyéthylène fonctionnalisé par voie plasma

par Mahsa Ghasemi

Thèse de doctorat en Génie des procédés et haute technologie

Sous la direction de Farzaneh Arefi-Khonsari.

Soutenue en 2007

à Paris 6 .

mots clés

• Polyéthylène [PE]
• Traitement plasma
• Quantification amines et aldéhydes
• Stabilité
• Trypsine, Immobilisation
• Activité enzymatique, stabilité
• Analyse XPS [Spectroscopie de photoélectrons X]

Résumé

Différents types de plasma basse pression ont été mis en œuvre afin d’incorporer des fonctions amines primaires à la surface de polyethylène (PE). Le glutaraldéhyde ensuite réagit avec les fonctions amines primaires de la surface, afin qu’il joue le rôle de bras espaceur. Enfin, la dernière étape consiste en l’immobilisation covalente de la trypsine via la réaction de l’extrémité libre du bras avec les groupements amine primaire portés par l’enzyme. La réduction des fonctions imine en amine secondaire a été effectuée à l’aide du cyanoborohydrure de sodium. L’activité enzymatique a été mesurée en suivant les cinétiques de dégradation du substrat N-a-Benzoyl-L-Arginine Ethyl Ester (BAEE). On a pu mettre en évidence une activité enzymatique d’environ 0,08 U/cm2 sur les échantillons. L’étude de la stabilité de l'activité au cours du temps et au cours d'essais répétitifs montre une activité significative pour le deuxième essai et une décroissance progressive jusqu'au 4ème.

Titre traduit

Trypsin immobilization on the surface of polyethylene treated with plasma processing

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