Etude du cytochrome P450 2J2 humain : recherche de substrats et d'inhibiteurs sélectifs ; détermination de la topologie de son site actif

par Pierre Lafite

Thèse de doctorat en Sciences de la vie et de la santé

Sous la direction de Daniel Mansuy.

Soutenue en 2007

à Paris 5 , dans le cadre de École doctorale du Médicament (....-2009Paris) , en partenariat avec Université Paris Descartes. Faculté de pharmacie de Paris (autre partenaire) .


  • Résumé

    Ce manuscrit présente une étude fonctionnelle et structurale du cytochrome P450 2J2 humain (CYP2J2), enzyme exprimée dans les tissus cardiovasculaires, dont les rôles biologiques sont mal connus. En utilisant la terfénadone comme base structurale, qui est un composé oxydé régiosélectivement par le CYP2J2, plusieurs composés ont été synthétisés se sont révélés être des inhibiteurs affins et sélectifs du CYP2J2. En particulier, un inhibiteur très affm et compétitif (Ki = 160 nM) et deux substrats suicides efficaces du CYP2J2 (kinact/Ki 3000 L/mol/s) ont été mis en évidence. L'étude de l'oxydation de ces composés par le CYP2J2 a révélé une régiosélectivité surprenante, en faveur d'une position chimiquement moins réactive vis-à-vis des oxydations. La caractérisation du site actif du CYP2J2 et l'identification de résidus importants pour la reconnaissance des dérivés de terfénadone a pu être réalisée en construisant un modèle par homologie 3D de cette enzyme et par le docking de certains dérivés dans le site actif du CYP2J2. Enfin, une étude préliminaire des rôles biologique possibles du CYP2J2 a été réalisée en étudiant les effets inhibiteur de ce P450. En conclusion, ce travail a permis de caractériser les premiers outils biochimiques d'étude des rôles biologiques du CYP2J2, de propose] une première topologie du site actif du CYP2J2, et d'affiner les rôles biologiques du CYP2J2.

  • Titre traduit

    The cytochrome P450 2J2 : new selective inhibitors and substrates ; characterization of its active site


  • Résumé

    This manuscript deals with the functional and structural study of human cytochrome P450 2J2 (CYP2J2), an enzyme mainly expressed in cardiovascular tissues, whose biological roles are not well known. We used terfenadone, regioselectively oxydized by CYP2J2, as a starting point for design and synthesis of several compounds, which revealed to be affine and selective inhibitors of this P450. In particular one affine and selective inhibitor (Ki =160 nM) and two efficient mechanism-based inactivators (kinact/Ki 3000 L/mol/s) of CYP2J2 were identified. The study of the CYP2J2-catalyzed oxidation of some of these compounds revealed a surprising regioselectivity, favoring a less reactive position, regarding the reactivity towards oxidation. The characterization of the active site and the identification of important residues for terfenadone derivatives recognition by CYP2J2 was achieved using an homology 3D model of this enzyme, and docking of several substrates in the active site. Finally, a preliminary study of the potential biological roles of CYP2J2 was performed by looking at the inhibitory effect of several compounds involved in the vascular relaxation pathways. In conclusion, this work provides the characterization of the firs biochemical tools to study the biological roles of CYP2J2, the first description of the active site topology and ; study on CYP2J2 biological roles.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (243 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 223-243

Où se trouve cette thèse\u00a0?

  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TPHA 11528
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.