Rôle de la protéine CFTR et du canal K+ TASK2 dans les phénomènes de régulation du volume des cellules du tubule proximal de rein de souris

par Sébastien L'Hoste

Thèse de doctorat en Sciences de la vie et de la santé

Sous la direction de Philippe Poujeol.


  • Résumé

    Le but de cette étude était de comprendre d’une part le mécanisme d’activation du canal K+ TASK2 au cours de la RVD et d’autre part le rôle de TASK2 et de CFTR dans un autre phénomène de régulation cellulaire intervenant durant l’apoptose : l’AVD (Apoptotic Volume Decrease). Pour cela, nous avons utilisé des lignées de cellules proximales provenant de rein de souris sauvages ou invalidées respectivement pour les gènes codant pour ces 2 protéines d’intérêt (TASK2 et CFTR). Lors de l’étude du mécanisme de régulation de TASK2 pendant la RVD (Regulatory Volume Decrease), nous avons montré que le choc hypotonique induit un flux de Cl- à travers du canal Cl- de type VRCC qui serait une « driving force » pour la sortie de HCO3- par l’échangeur Cl-/HCO3- entraînant l’alcalinisation du pH externe indispensable à l’activation du canal TASK2. Lors de l’étude du rôle de TASK2 et de CFTR dans l’apoptose des cellules proximales, nous avons montré que l’application d’un agent apoptotique provoquerait un efflux de glutathion relié à l’activité de CFTR ce qui permettrait une augmentation des ROS. Au final, cette élévation activerait, par un mécanisme encore inconnu, l’augmentation des conductances Cl- de type VRCC et K+ de type TASK2 induisant ainsi une diminution du volume cellulaire indispensable à l’entrée des cellules en apoptose. Par contre, dans les cellules task2 -/-, incapables de réguler leur volume lors d’un choc hypotonique, nous avons pu mesurer une AVD et une activité de la caspase-3 réduites de 60% comparées aux cellules sauvages. Nous avons mis en évidence une compensation du canal TASK2 par un canal K+ de large conductance sensible au calcium, Maxi-K channel.

  • Titre traduit

    Role of CFTR and TASK2 in the phenomenon of volume regulation in proximal cell lines from mouse kidney


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    The aim of the present study was to determine first the mechanism responsible for the activation of TASK2 channels during RVD and second the role of CFTR and TASK2 in the regulation of the apoptotic volume decrease (AVD) as well as the cascade of events leading to apoptosis. For this purpose, we used renal cells immortalized from primary cultures of proximal convoluted tubules (PCT) from wild type and CFTR or TASK2 knock-out mice (cftr -/-, task2 -/-). During the hypotonic shock, we have shown that bicarbonates efflux is a key role in the alkalization of external pH triggering activation of TASK2 channels during hypotonic shock. Our results indicate that Cl- efflux via Cl- channels is the driving force for HCO3- exit through the activation of Cl-/HCO3- exchanger. This HCO3- efflux alkalinizes external pH, which leads to the activation of TASK2 channels. Concerning the role of TASK2 and CFTR in apoptosis of proximal cells, we have shown that the apoptotic inducer application induced a ROS production by CFTR-dependent efflux of glutathione. Finally, this ROS elevation could activate swelling activated Cl- and TASK2 K+ conductances involved during cell volume decrease, a prerequisite event leading to apoptosis phenomenon. However, the task2 -/- cells, which are unable to regulate their volume during hypotonic shock, underwent apoptosis with a moderate AVD and caspase-3 activity. In these cells, the K+ conductance recording showed that TASK2 K+ channel could be compensated probably by calcium-activated K+ channel, Maxi-K channel.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (139 p.)
  • Annexes : Bibliogr. p. 127-139. Résumé en français

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  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : 07NICE4040
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