Régulation de la phosphorylation de Cenp-E au cours du cycle cellulaire

par Amaury Gaussen

Thèse de doctorat en Biochimie et biologie moléculaire

Sous la direction de Ariane Abrieu.

Soutenue en 2007

à Montpellier 2 .


  • Résumé

    Au cours du cycle cellulaire, la mitose assure la distribution équitable des chromosomes dupliqués dans une paire de cellules filles. Cette phase est hautement régulée par de nombreuses protéines dont la localisation et l'activité spécifique permettent le bon déroulement de cette étape. Les protéines mitotiques sont elles-mêmes l'objet de régulations, notamment par phosphorylation. Parmi elles, Cenp-E est une kinésine impliquée dans la congression des chromosomes et dans l'activation du point de contrôle dépendant de l'attachement des fuseaux aux kinétochores. Dans la première partie de ce travail de thèse, nous décrivons dans les extraits d'œufs de xénopes quels domaines de Cenp-E lient les kinétochores et la protéine BubR1, dont elle est l'activateur nécessaire à l'activation du point de contrôle mitotique. Par la suite nous décrivons une régulation par phosphorylation sur la sérine 2893 de Cenp-E. Cette phosphorylation, conservée chez l'Homme, est spécifique en mitose et pourrait être attribuée au complexe Cdk1-Cycline B. La phosphorylation sur la sérine 2893 participerait à la levée de l'inhibition exercée par le domaine « tail » de Cenp-E sur son domaine moteur en restaurant une motilité partielle. La dernière partie de ce travail documente pour la première fois un motif consensus de phosphorylation pour la kinase MPS1, impliquée notamment dans l'activation du point de contrôle de mitose. Ce motif est très proche de celui connu pour PLK1. Nous mettons alors en évidence que certains sites de Cenp-E sont phosphorylés in vitro aussi bien par MPS1 que par PLX1. De plus, l'analyse par spectrométrie de masse a identifié que MPS1 phosphoryle notamment le domaine « tail » de Cenp-E sur une tyrosine, ce qui n'avait jamais été décrit jusqu'à présent pour les substrats connus de MPS1. Ce travail décrit de nouvelles régulations par phosphorylations sur Cenp-E et attire l'attention sur la similitude des spécificités de substrats pour MPS1 et PLK1

  • Titre traduit

    Regulation of Cenp-E phosphorylation during celle cycle


  • Résumé

    During cell cycle, the correct and equal distribution of duplicated chromosomes in each daughter cells occurs in mitosis. Mitosis is performed through high regulations by numerous proteins specified by their localisation and activity. Those proteins are themselves regulated, notably by phosphorylation. Among them, Cenp-E is a kinesin implicated in congression and spindle checkpoint. The first part of this work describe which Cenp-E domains binds to kinetochores and BubR1 kinase, in Xenopus egg extracts. Cenp-E is supposed to be BubR1's activator, nesessary for spindle checkpoint activation. We describe later how Cenp-E is regulated by phosphorylation on serine 2893. This residue is also conserved and phosphorylated specifically during mitosis onto the human protein version. The Cyclin B-Cdk1 complex is likely to be responsible for this phosphorylation wich also takes part in the inhibition release of the Cenp-E motor domain and restores a part of the Cenp-E motility. The last part of this work gives for the first time a phosphorylation consensus sequence of MPS1, a kinase also implicated in spindle checkpoint activation. This consensus motif is very close to the PLK1 one's. In fact Cenp-E can be phosphorylated in vitro onto the same sites by both MPS1 and PLX1. For the first time mass spectrometry analysis identified a tyrosine phosphorylated by MPS1 in vitro, which suggests that MPS1 could be the first identified tyrosine kinase present at the kinetochore. This work describe new regulations on Cenp-E by phosphorylation and warn on the similar substrate specificity shared by MPS1 and PLK1

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (166 f.)
  • Annexes : Bibliogr. f. 125-140. Annexes

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS 2007.MON-99
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.