Prévention de la dysplasie broncho-pulmonaire : vers une mise au point de vecteurs adénoviraux ciblant le tissu pulmonaire sans toxicité pour son développement

par Paul Waszak

Thèse de doctorat en Sciences de la vie

Sous la direction de Pierre Boulanger.

Soutenue en 2007

à Lyon 1 .

mots clés

• Adénoviridés
• Thérapie génique
• Emphysème pulmonaire
• Dysplasie bronchopulmonaire
• Apoptose
• Ciblage d'un gène

Résumé

Nous avons démontré chez le rat nouveau-né qu’un vecteur adénoviral (Ad) de sérotype 5, administré par voie trachéale au delà d’une dose seuil, était responsable de troubles de l’alvéolisation caractérisés par une distension alvéolaire et une diminution de sa septation. Nos résultats ont montré un faible rôle de l’inflammation et de la transduction, contrairement à la diminution de l’élastogenèse, de la prolifération épithéliale et l’augmentation de l’apoptose. Le motif RGD de la base de penton est apparu fondamental: muté, il augmente l’inflammation ; surexposé, il majore la distension pulmonaire en accélérant l’apoptose. Ces résultats mettent en valeur le rôle de l’apoptose dans la toxicité de l’Ad5, à reconsidérer pour la mise au point de vecteurs non toxiques, au même titre qu’un ciblage adéquat du parenchyme alvéolaire. Dans cet objectif, la sélection de ligands cellulaires par la technique du phage display in vivo par voie systémique intra-péritonéale s’est avérée infructueuse

Titre traduit

Prevention of bronchopulmonary dysplasia : towards a construction of adenoviral vectors targeting lung parenchyma without alteration of its development

Résumé

We have demonstrated that intratracheal administration of adenoviral vector (Ad) type 5 to newborn rat, beyond a threshold dose, was responsible for alveolar development disorders, characterized by an alveolar distension and a decreased septation. These results were associated with a weak participation of inflammation and transduction, unlike the decreases in elastogenesis, epithelial proliferation, and the increase in apoptosis. The penton base RGD motif appeared essential: mutated it increased inflammation; overexposed, it worsened the lung distension by accelerating the apoptosis. These results underline the role of apoptosis in order to construct non toxic Ad vectors, as also alveolar parenchyma targeting. To this aim, selecting cellular ligands by the in vivo phage display technique, via the intraperitoneal route, was fruitless