2008-11-26T23:59:59Z
2020-11-12T04:26:26Z
Dynamique des bicouches lipidiques supportées
2007
2007-01-01
Au cours de ce travail, nous avons étudié la dynamique des phospholipides constitutifs des bicouches lipidiques supportées sur des substrats solides. A laide dun dispositif de retour de fluorescence après photoblanchiment (FRAPP : Fluorescence Recovery After Patterned Photobleaching), nous avons mis en évidence différents comportements diffusifs suivant la nature du substrat (rugosité et chimie), le phospholipide et la méthode de préparation de la bicouche. La mesure du coefficient de diffusion en fonction de la température nous a permis détablir un ensemble de données fiables et reproductibles sur la transition de phase gel-fluide de ces systèmes. Il est apparu que leur diffusion dépendait de la nature du substrat. En effet, sur le verre, où les deux feuillets ont la même dynamique, on observe une transition couplée. Au contraire, sur le mica, le feuillet proximal a une dynamique plus lente que le feuillet distal qui est quasiment libre de toute interaction avec le support. La méthode de préparation sest également révélée être un paramètre crucial puisque nous avons obtenu une plus grande dispersion des mesures en préparant les bicouches par éclatement de vésicules par rapport à la technique de Langmuir-Blodgett / Langmuir-Schaeffer qui donnent des échantillons sans microdomaines. Nous avons également déterminé les énergies dactivation des différentes phases ainsi que les enthalpies de transition pour les deux phospholipides étudiés. Ce travail constitue une étape primordiale dans la compréhension des mécanismes diffusifs de systèmes plus complexes.
During this thesis, we have investigated the lateral mobility of pospholipids in supported lipid bilayers on solid substrates. Using the technique of Fluorescence Recovery After Patterned Photobleaching (FRAPP), we display different diffusive behaviors depending on the substrate nature (roughness, chemistry), the phospholipid type and the preparation method of the bilayer. Measuring the diffusion coefficient versus temperature allows us to establish a solid and repeteable set of data concerning the phase transition of such systems and understand the involved mecanisms. Depending of the nature of the substrate, we observe two different behaviors : on glass, both leaflets of the bilayer have the same dynamics indicating that the transition is coupled ; on mica, the proximal leaflet diffuses slowly than the distal one, the latter having almost no interaction with the substrate. The way of preparation is a crucial parameter which shows a greater dispersion of the diffusion measurements using bilayers from vesicles fusion with respect to Langmuir-Blodgett / Langmuir-Schaeffer techniques that engender more homogeneous samples. We also determine activation energies of the different phases and the transition enthalpies of both used phospholipids. This work represents a fundamental stage for the comprehension of diffusive mecanisms of more complex systems such as lipid mixture containing membrane proteins.
Lipides
Fluorescence
Enthalpie
Scomparin, Carole
Tinland, Bernard
Aix-Marseille 2
Ecole Doctorale Physique et Sciences de la Matière (Marseille)