Rôle de la protéine phosphatase 2C Wip1 dans la régulation du suppresseur de tumeurs Chk2 en réponse au stress génotoxique

par Manel Oliva Trastoy

Thèse de doctorat en Sciences biologiques. Gènes, génomes, cellules

Sous la direction de François Leteurtre.


  • Résumé

    Les cellules de mammifère possèdent des mécanismes de défense garantissant la correcte transmission de l'information génétique. L'ensemble des réponses cellulaires mises en œuvre lors de l'endommagement de l'ADN est appelé " checkpoint de l'ADN ". Notre étude porte sur la protéine kinase suppresseur de tumeurs Chk2. Les mutations du gène CHEK2 ont été corrélées au syndrome tumoral de Li-Fraumeni chez l'Homme. Pré-activée par phosphorylation de façon ATM-dépendante sur le résidu thréonine 68 (Thr68) lors d'un stress génotoxique, puis finalement activée par autophosphorylation sur la boucle T, Chk2 phosphoryle à son tour ses substrats qui sont impliqués dans l'arrêt du cycle cellulaire, la réparation des dommages de l'ADN et l'apoptose. Les mécanismes d'activation de Chk2 sont globalement bien connus, mais on ne sait toujours pas comment se déroule sa désactivation lorsque les lésions de l'ADN ont été réparées. Le laboratoire a montré en 2002, chez la levure, que les protéines phosphatases 2C de levure Ptc2/3 sont nécessaires à l'inactivation du checkpoint induit par une cassure double brin. Nous montrons ici que cette voie de signalisation est conservée dans les cellules humaines : après une irradiation, la protéine Wip1, ou PP2Cδ, codée par l'oncogène PPM1D, se lie à Chk2 et la déphosphoryle, principalement sur la phospho-Thr68. Wip1 est donc capable de s'opposer à l'activation de Chk2 par ATM. De plus, en utilisant deux lignées tumorales humaines HCT15, l'une n'exprimant pas d'activité Chk2, et l'autre exprimant la protéine HA-Chk2 à des niveaux endogènes, nous avons montré que la surexpression de Wip1 supprime la contribution de Chk2 dans l'arrêt du cycle en phase G2.

  • Titre traduit

    Role of type 2C protein phosphatase Wip1 in regulating the tumour suppresor kinase Chk2 upon genotoxic stress


  • Résumé

    Mammalian cells possess several mechanisms which guarantee the proper transmission of genetic material. The whole of these cellular answers induced by DNA damage is called “DNA checkpoint”. Our study relates to the tumour suppressor kinase protein Chk2. Mutations in the CHEK2 gene have been reported in families with Li-Fraumeni syndrome. Pre-activated by phosphorylation on threonine 68 (Thr68) by ATM at the time of a genotoxic stress, Chk2 is finally activated by autophosphorylation on its T-loop. Chk2 then phosphorylates its substrates which are involved in stopping cell cycle progression, and promoting DNA repair and apoptosis. Whereas Chk2 activating mechanisms are overall well known, little is known about how the return to the physiological state is held when DNA has been repaired. Our laboratory showed in 2002, in the yeast, that type 2C protein phosphatases Ptc2/3 are required for the inactivation of the checkpoint induced by a double strand break. Our current study puts in obviousness that this mechanism is preserved in human cells. In response to DNA damage, Wip1 protein, also called PP2Cδ and coded by the PPM1D oncogene, binds and dephosphorylates Chk2, mainly on the phospho-Thr68. Wip1 is thus able to antagonise ATM activation of Chk2 by ATM after an ionizing radiation. Moreover, by using two HCT15 tumoral human cell lines, one possessing no Chk2 activity, and the other expressing at endogenous levels the HA-Chk2 protein, we have shown that Wip1 overexpression annihilates the Chk2 contribution to the stop in G2 phase. Thus, our results indicate that Wip1 phosphatase is able to negatively regulate the Chk2 activity upon a genotoxic stress.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol., 197 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 166-186. Index

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 0g ORSAY(2006)53
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.