Caractérisation du rôle de PDR1 dans la réponse précoce au stress chimique chez la levure Saccharomyces cerevisiae

par Vivienne Fardeau

Thèse de doctorat en Génomes et protéines

Sous la direction de Claude Jacq.

Soutenue en 2006

à Paris 7 .


  • Résumé

    La résistance multiple aux drogues est un phénomène qui se caractérise par des changements de la membrane plasmique permettant une expulsion des drogues hors de la cellule. L'état constitutif de résistance multiple aux drogues a été caractérisé : les transporteurs membranaires ainsi que les facteurs de transcription régulant l'expression de ces protéines sont maintenant connus, permettant de reconstituer un réseau de régulation complexe et redondant. Toutefois, la dynamique de ce réseau, dans des conditions physiologiques, était mal connue. Afin de comprendre comment la cellule met en place des mécanismes de défense en réponse à un stress chimique, la réponse du transcriptome a été analysée par puce à ADN après différents temps d'incubation en présence de fluphéna/ine, un inhibiteur de la calmoduline. Ces résultats, comparés à ceux obtenus pour un antimitotique, le bénomyl ont permis de caractériser la réponse commune à différentes drogues, nommée « early PDR ». Il a été montré que Pdrlp est indispensable à la mise en place de cette réponse. Des expériences d'immunoprécipitation de chromatine sur puces à ADN on11 indiqué que ce facteur est fixé de façon constitutive sur ses promoteurs cibles. Pdr1p joue donc à la fois un rôle dans l'induction basale et dans l'activation de ses gènes cibles. Par ailleurs, l'étude de la réponse au sélénite, un métalloïde a fort pouvoir oxydant, a permis de mettre en évidence la régulation transcriptionnelle du gène PDR1 par Rpn4p, un facteur de transcription impliqué dans la régulation du protéasome. Dans ce contexte physiologique, Pdr1p a pour fonction de seconder Yap1p dans la mise en place de la réponse au stress oxydant.

  • Titre traduit

    The central role of Pdr1p in the foundation of yeast drug resistance


  • Résumé

    The widespread pleiotropic drug resistance phenomenon is well described as the long term selection of genetic variants expressing constitutively high levels of membrane transporters involved in drug efflux. However, the transcriptional cascades leading to the PDR phenotype in wild-type cells are largely unknown and the first steps of this phenomenon are poorly understood. We investigated the transcriptional mechanisms underlying the establishment of an efficient PDR response in yeast. We show that, within a few minutes of drug sensing, yeast elicits an effective PDR response. This early -PDR response is highly dependent on the Pdr1p transcription factor, which is also one of the major genetic determinants of long-term PDR acquisition. The activity of Pdrlp in early drug response is. Not drug-specific, as two chemically unrelated drugs, benomyl and fluphenazine, elicit identical, Pdr1p-dependent, ePDR patterns. Moreover, Pdr1p is an original stress response factor since its DNA-binding properties do not depend on the presence of drugs. Thus, Pdr1p is a promoter-resident regulator involved in both basal expression and rapid drug-dependent induction of PDR genes. While studying the effect of the selenite on yeast transcriptome, we demonstrated that PDR1, which was believed to be constitutively expressed in yeast cells, was also induced by selenite and this effect appeared to be dependent on Rpn4p, the proteasome transcriptional activator. Additionally, it has also been shown that Pdr 1p plays a role in the establishment of the complete response to oxidative stress mediated by Yap1p.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (181 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 109 réf.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2006) 199
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