Translocation de lipides non marqués mesurée par changements de forme de vésicules géantes : le cas de la céramide

par Ivan Lopez-Montero

Thèse de doctorat en Biophysique moléculaire

Sous la direction de Philippe F Devaux.

Soutenue en 2006

à Paris 7 .

  • Titre traduit

    Unlabelled lipid translocation measured by shape changes in giant vesicles : the case of ceramide


  • Pas de résumé disponible.


  • Résumé

    Une asymétrie de surface de 0. 1 % entre les deux monocouches dans des vésicules géantes (GUVs) suffit pour déclencher un changement de leur forme. L'incorporation des molécules exogènes dans le feuillet externe d'une vésicule prolate produit la formation d'un bourgeonnement. La redistribution par diffusion transversale (flip-flop) des molécules dans les deux feuillets induit la récupération à la forme prolate. Le temps moyen de flip-flop spontané des molécules non marqués incorporées peut être calculé à partir des temps mesurés des deux transitions de forme. Un temps de flip-flop inférieur à une minute à 37 °C a été mesuré pour la céramide naturelle (C6-Cer, C10-Cer, C16-Cer). La méthode a été validée par des mesures spectroscopiques (RPE) du flip-flop d'analogues de céramide dans des LUVs. Les changements de forme des vésicules permettent également la détection du flip-flop de lipides endogènes par des protéines possédant une fonction de translocation lipidique (flippases). Nous avons reconstitué la P-gP (purifiée) et l'aminophospholipide translocase (à partir de membrane de globule rouge humain) dans des GUVs. L'activation de ces protéines par l'ajout d'ATP à l'extérieur des vésicules produit des changements des formes en accord avec un transport lipidique actif.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (295 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 314 réf.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2006) 189
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