Etude du mode d'action de la protéine Maf1 lors de la répression de la transcription par l'ARN polymérase III chez Saccharomyces cerevisiae

by Danuta Oficjalska

Doctoral thesis in Microbiologie

Under the supervision of André Sentenac.

Soutenue en 2006

à Paris 7 .


  • Résumé

    L'ARN polymérase III (Pol III), avec P aide de facteurs multiprotéiques, synthétise les ARN de transfert, l'ARN ribosomique 55 et d' autres ARN stables et non traduits. La transcription de ces gènes par la Pol III joue un rôle essentiel dans le contrôle de la synthèse protéique et des croissance et prolifération cellulaires. La Pol III interagit physiquement avec Maf1, une protéine conservée chez les eucaryotes supérieurs. Maf1 réprime P expression des gènes transcrits parla Pol III. Nous avons montré par immunoprécipitation de chromatine analysée sur puce à ADN qu' en réponse à un stress cellulaire, Maf1 réduit P occupation de P ensemble des gènes de classe Hl par la Pol III et par Brf1, un composant du facteur général de transcription TFINB. Les mécanismes moléculaires de P action de Mafl ont été en partie identifiés. En conditions normales de croissance Maf1 est phosphorylée et localisée dans le cytoplasme. En revanche, suite à P application d' une condition de régulation de la transcription par la Pol III (traitement par la rapamycine), Maf1 est déphosphorylée via la phosphatase PP2A, faisant partie de la voie de signalisation TOR. Cette déphosphorylation est corrélée avec la relocalisation de Maf1 dans le noyau où cette protéine, dans sa forme déphosphorylée, s' associe avec la Pol III et inhibe la synthèse des transcrits. Ces résultats indiquent que la transcription des gènes de classe III est régulée grâce au contrôle de la localisation cellulaire et de P état de phosphorylation de la protéine Maf1, qui apparaît alors comme un régulateur « classique » de la transcription. Le mécanisme d' action de Maf1 chez les eucaryotes supérieurs semble conservé. L'inactivation du gène homologue de MAF1 chez la souris devrait permettre d' estimer l' importance de cette protéine dans le développement et dans le processus de cancérisation

  • Alternative Title

    Maf1 mode of action during RNA polymerase III transcription in budding yeast


  • Abstract

    In all eukaryotes, the RNA polymerase III (Pol III) is specialized for the transcription of a specific gene class. In Saccharomyces cerevisiae, with the help of general transcription factors, Pol III synthesizes small and stable untranslated RNA (tRNA, rRNA 5S. . . ). Pol III transcription plays a major role in the cellular growth and proliferation. Maf1 is a well conserved protein which represses Pol III transcription and interacts with the Pol III enzyme. We report here genome-wide analyses that establish Maf1 as a general and direct repressor of yeast Pol III transcription. Chromatin immunoprecipitation coupled to microarray hybridization experiments showed an increased association of Maf1 to Pol Ill-transcribed genes under repressing condition (rapamycin treatment), correlated with a dissociation of Brf1 and Pol III. Maf1 can exist in various phosphorylation states and interacts with Pol III in its under-phosphorylated state. Under repressing conditions, Maf1 is dephosphorylated by a protein phosphatase type 2A (PP2A)-dependent pathway, accumulates in the nucleus and Pol lll Maf1 interaction increases. The results indicate that Pol III transcription can be globally and rapidly down regulated via dephosphorylation and relocation of a general negative cofactor Maf1. In higher eukaryotes, the mechanism of Maf1 functioning seems to be conserved. To know whether Maf1 is important for development and tumor formation, we initialized the construction of MAF1 knock-out mouse.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (172 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Réf. bibliogr. p157-172

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2006) 145
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