Formation de domaines de types "rafts" dans des vésicules unilamellaires et mécanismes physico-chimiques de l'extraction de domaines membranaires

par Virginie Coste

Thèse de doctorat en Biophysique

Sous la direction de Miglena Angelova.

Soutenue en 2006

à Paris 6 .


  • Résumé

    Dans ce travail, nous nous sommes intéressés à l’étude de la coexistence de phases liquide-ordonnée (lo) et liquide-désordonnée (ld) au sein de membranes modèles de type LUV (« Large Unilamellar Vesicle »). Nous avons cherché en premier lieu à mettre au point une méthodologie permettant de détecter la formation de la phase lo et d’estimer quantitativement la fraction membranaire Φo en phase lo dans des LUVs de composition ternaire PC/SM/Chol (phosphatidylcholine/sphingomyéline/cholestérol). Pour cela, les propriétés d’auto-extinction de fluorescence et de distribution sélective en fonction de la phase lipidique d’une sonde fluorescente unique (C12NBD-PC) ont été mises à profit. La deuxième partie de notre travail a été consacrée à l’étude de la solubilisation par le détergent Triton X-100 des membranes de LUVs présentant une coexistence de phase lo/ld. Nous avons cherché à démontrer qu’il était possible d’extraire la fraction membranaire se trouvant strictement en phase lo par l’étude des transitions de structure induites par l’interaction du Triton X-100 avec des LUVs à 4°C.

  • Titre traduit

    "Raft-like" domains formation in unilamellar vesicles and physics-chemistry mechanisms of membrane domains extraction


  • Résumé

    In this work, we have been interesting in the study of the liquid-ordered/liquid-disordered (lo/ld) phase coexistence within LUV (Large Unilamellar Vesicle) membranes model. First, we have attempted to develop a methodology both allowing the detection of lo phase formation and the quantitative estimation of membrane fraction Φo occupied by lo phase in LUV of ternary composition: PC/SM/Chol (phosphatidylcholine /sphingomyeline /cholesterol). For this purpose, the properties of fluorescence self-quenching and selective partitioning between lipid phases of a unique fluorescent probe (C12NBD-PC) were used. The second part of our work has been dedicated to the study of the solubilization of LUVs showing lo/ld phase coexistence by Triton X-100 detergent. Our aim was to demonstrate the possibility to extract strictly lo phase membrane fraction, by the study of structural transitions induced by Triton X-100 interactions with LUVs at 4°C.

Autre version

Cette thèse a donné lieu à une publication en 2006 par [CCSD] à Villeurbanne

Formation de domaines de types "rafts" dans des vésicules unilamellaires et mécanismes physico-chimiques de l'extraction de domaines membranaires

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Informations

  • Détails : 1 vol. (160 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 127-138

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  • Cote : T Paris 6 2006 159

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  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : 2006PA066159
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