Rôle de la mobilisation calcique dans la régulation de la réponse oxydative dans un modèle de neutrophiles humains

par Sabrina Bréchard

Thèse de doctorat en Biologie structurale, moléculaire et cellulaire

Sous la direction de Eric Tschirhart.


  • Résumé

    En réponse à un stimulus, la réponse oxydante suite à l'assemblage de la NADPH oxydase est une fonction biologique fondamentale des phagocytes. Une réponse exagérée se caractérise par la pérennisation de l'inflammation. Ce travail a pour but de caractériser la relation entre l'élévation de la concentration de Ca2+ libre cytosolique ([Ca2+]i) et la réponse oxydante, induite par le N-formyl-L-Méthionyl-L-Leucyl-L-Phénylalanine (fMLF), dans un modèle de neutrophiles humains : les cellules HL-60 différenciées. La mesure simultanée de la [Ca2+]i et de la production d'H2O2 nous a permis de montrer que l'entrée de Ca2+ extracellulaire, activée par la vidange des stocks intracellulaires de Ca2+, est nécessaire à l'initiation de la réponse biologique en réponse au fMLF. L'ADP-ribose cyclique est impliquée dans cette mobilisation calcique. En outre, la sensibilisation des cellules par l'interleukine-8 augmente la production d'H2O2 induite par le fMLF et est dépendante d'une entrée de Ca2+ extracellulaire. Par une approche biochimique nous avons établi que la translocation membranaire des protéines Rac (nécessaires à l'activation de la NADPH oxydase) est dépendante de l'élévation de la [Ca2+]i, tandis que par une approche moléculaire nous avons identifié les canaux potentiellement impliqués dans l'entrée capacitive de Ca2+. La réponse oxydante, via la translocation de Rac, est dépendante d'une entrée de Ca2+ extracellulaire. Elle répond au mécanisme d'entrée capacitive résultant de l'activation de canaux calciques (récepteurs potentiels transitoires) par différents messagers mobilisateurs du Ca2+.

  • Titre traduit

    Role of calcium mobilization in the regulation of the oxydative response in a model of human neutrophils


  • Résumé

    In response to a stimulus, the oxidative response, resulting of the NADPH oxidase assembly, is a fundamental biological function of phagocytic cells. An excessive response is associated to chronical inflammations. In this study, we have investigated the relation between the elevation of cytosolic-free calcium concentration ([Ca2+]i) and oxydative response, induced by N-formyl-L-Methionyl-L-Leucyl-L-Phenylalanine (fMLF), in a model of neutrophils: differentiated HL-60 cells. We have demonstrated, by simultaneously measurements of [Ca2+]i and H2O2 production, that extracellular Ca2+ entry, regulated by the intracellular Ca2+ release stores, is necessary to the biological response initiation in response to fMLF. Cyclic ADP-ribose is implicated in this calcium mobilization. Furthermore, interleukin-8 priming of cells increases H2O2 production dependently of extracellular Ca2+ entry. By biochemical studies, we have estasblished that the translocation of Rac proteins is tightly correlated to an [Ca2+]i elevation, whereas with molecular studies we have identified capacitative channels probably implicated in the extracellular Ca2+ entry. The oxydative response, via Rac translocation is dependent on extracellular Ca2+ entry by the capacitative mechanism resulting of the calcium channels activation (potentiel transient receptors) stimulated by differents second messengers mobilizing Ca2+.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (202 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 175-200

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université de Lorraine (Villers-lès-Nancy, Meurthe-et-Moselle). Direction de la Documentation et de l'Edition - BU Sciences et Techniques.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : SC N2006 3
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