Facteur tissulaire et Tissue Factor Pathway Inhibitor en pathologie vasculaire humaine : mise en évidence d'une régulation génétique, environnementale et épigénétique

par Christophe Zawadzki

Thèse de doctorat en Biochimie et biologie moléculaire

Sous la direction de Brigitte Jude.

Soutenue en 2006

à Lille 2 .


  • Résumé

    Le facteur tissulaire (FT) est le principal initiateur de la coagulation in vivo. Son activité est régulée par des inhibiteurs de type Kunitz appelés Tissue Factor Pthway Inhibitor (TFPI) et TFPI-2. L'implication de la voie du FT en pathologie thrombotique est très vraisemblable. L'objectif de ce travail a été d'étudier la régulation de la voie du FT chez l'homme en pathologie thrombotique par plusieurs approches. Dans une première étude, nous avons recherché, par Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) puis Restriction Length Fragment Polymorphism (RFLP), des anomalies dans les exons 2 à 5 codant pour le domaine extracellulaire du FT chez 322 patients avec antécédents thrombotiques veineux et 202 témoins. Une substitution Arg200Trp (R200W) située dans la seconde boucle du FT nécessaire à la liaison des facteurs IX et X, a été retrouvée à l'état hétérozygote chez 2 témoins qui présentent une expression basse de l'antigène FT dans leurs cellules mononucléées circulantes. Le mutant soluble sTFR200W a une activité biologique réduite par rapport à la molécule sauvage et précipite sous forme de microfibrilles au pH physiologique. Dans cette étude, nous avons découvert une nouvelle mutation du gène FT de faible prévalence mais diminuant les propriétés procoagulantes de la molécule. Nos données suggèrent que la mutation R200W pourrait avoir un effet " protecteur " vis à vis de la thrombose. Dans un second travail, nous avons étudié l'effet de la dyslipidémie et des statines sur l'équilibre entre FT et TFPI dans la plaque d'athérosclérose carotidienne. Nous avons mesuré l'activité procoagulante du FT, son antigène, l'antigène TFPI et le ratio des antigènes FT/TFPI chez 16 patients non dyslipidémiques, 26 dyslipidémiques (apoB/apoA1>0. 7) traités et 44 dyslipidémiques non traités par statine. Le ratio FT/TFPI et l'activité FT globale des plaques des patients dyslipidémiques augmentent. LA dyslipidémie apparaît comme un facteur prédictif indépendant d'un niveau bas de TFPI élevé. Chez les patients sous statine, ce déséquilibre est corrigé par la diminution du FT sans diminution en parallèle du TFPI; ce qui ramène le ratio FT/TFPI mais aussi l'activité FT au niveau des patients non dyslipidémiques. Ce travail démontre que dans la plaque le ratio FT/TFPI augmenté par la dyslipidémie peut être corrigé par les statines. Dans une troisième étude, nous avons analysé la régulation de l'expression du TFPI-2 par méthylation de son gène dans 59 plaques d'athérosclérose carotidienne et 26 artères mammaires contrôle, par Methylation Specific PCR. Une méthylation de la région distale du promoteur, contenant les sits Sp1 en -214 et egr-1/Sp1 en -118 essentiels à l'expression inductible du TFPI-2, est retrouvée dans 13 plaques (22%) mais dans aucune des artères mammaires. Ces échantillions méthylés présentent des niveaux de transcrits significativement plus bas que les non méthylés et que les artères mammaires. Cependant, l'activité MMP-9 et la prévalence des facteurs de risque cardiovasculaire et des antécédents d'accidents ischémiques cérébraux ne sont pas différents entre les échantillons méthylés et non méthylés. Au total, ce travail démontre pour la première fois l'existence d'une méthylation du gène du TFPI-2 dans la plaque d'athérosclérose qui est associée à une expression réduite de son transcrit. L'effet de la méthylation du gène TFPI-2 sur l'activité des métalloprotéases et le survenue des accidents artériels reste à déterminer. Ces 3 études montrent que la voie du FT est régulée de façon complexe, au niveau génétique, environnemental et épigénétique.


  • Pas de résumé disponible.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (198 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 167-198

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université du droit et de la santé. Service Commun de la Documentation. BU Santé - Learning center.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 50.379-2006-20-C
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 7048
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.