Dynamique et fonction de survivine au sein du complexe des protéines passagères

par Marlène Delacour-Larose

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de Annie Molla.

Soutenue en 2006

à l'Université Joseph Fourier (Grenoble) .


  • Résumé

    Dans des cellules de Mammifères, la famille des protèines passagères comprend cinq membres, Aurora-B, Survivine, INCENP, Boréaline et TD-50. Quatre d'entre elles s'associent pour former le complexe des protéines passaqères. Ce complexe régule de nombreuses étapes de la mitose : l'alignement des chromosomes en plaque métaphasique, le passaqe du point de contrôle mitotique et la cytodiérèse. Le mécanisme d'action de la kinase Aurora-B est de mieux en mieux compris. Néanmoins le rôle et l'agencement des protéines non catalytiques au sein du complexe restent à résoudre. En combinant les techniques d'ARN interférence et de microscopie de fluorescence ex vivo, nous avons montré que les protéines Survivine et Aurora-B sont recrutées aux centromères indépendamment de la formation du complexe. Par la suite, nous nous sommes intéressés au rôle de Survivine. En réalisant des expériences de FRAP nous avons mis en évidence que Survivine est une protéine très mobile aux centromères. Cette mobilité est corrélée à la présence d'un complexe des protéines passaqères complet et fonctionnel et plus précisément à l'activité kinase d'Aurora-B. L'étude des relations entre la mobilité de Survivine et l'activité d'Aurora-B nous a conduit à étudier le résidu thréonine 117 de Survivine phosphorylé in vitro par Aurora-B. La mutation de cette thréonine en alanine ou glutamate entraîne des défauts mitotiques aussi sévères que l'absence de Survivine. De plus, la protéine mutée Survivine T117A est moins mobile que la protéine sauvage. La présence d'un résidu phosphorylable en position 117 dans la séquence de Survivine est donc nécessaire à la dynamique et à la fonction de Survivine en métaphase


  • Pas de résumé disponible.

  • Titre traduit

    Dynamic and fonction of surviving in mitosis


  • Résumé

    Passenger proteins have a characteristic localization during mitosis. Ln mammalian cells passenger proteins comprise Aurora-B, Survivine, INCENP, Boréaline and TD-50. For of them are associated in the passenger protein complex (or chromosomal passenger complex). This complex is a key regulator of metaphase chromosome alignment, spindle checkpoint function, and cytokinesis. The activity of Aurora-B in mitosis is well characterised. However the role and the organization of the non catalytic proteins in the complex are poorly understood. Through RNA Interference and microscopy of living cells, we showed that passenger proteins are recruited to centromeres in absence of a complete complex. Next. We studied more specifically the role of Survivin and its place in the complex. FRAP experiments on Survivin-GFP showed that this protein is very mobile in prometaphase and metaphase. The mobility of Survivin is dependent on the activity of the passenqer complex and more precisely of the Aurora-B's activity. We then demonstrated that the threonine 117 in the sequence of Survivin is necessary for its mobility. FRAP experiments on the mutant protein Survivin T117A-GFP show that this protein is immobile on centromere and suggest that Survivin is associated in oligomere in the complex. Ln addition, the mutant protein Survivin T117 A is not functional and is not able to restore mitotic progression. Ali these results stronqly suggest that Survivin, with its mobility and its phosphorvlation of T117, is an essential actor of the passenger protein complex in metaphase.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (184 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 171-184

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire de Sciences.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TS06/GRE1/0139
  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire de Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS06/GRE1/0139/D
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.