Mise au point d'une nouvelle génération de capteurs recombinants fluorescents pour la mesure de l'activité des caspases au sein de cellules vivantes au cours de l'apoptose

par Laura Schembri

Thèse de doctorat en Sciences biologiques et médicales. Biologie - Santé

Sous la direction de François Ichas.

Soutenue en 2006

à Bordeaux 2 .


  • Résumé

    L'apoptose est un processus de mort cellulaire génétiquement programmé, dont tout dysfonctionnement peut générer la formation de tumeurs cancéreuses. Un événement clef de l'apoptose est représenté par l'activation des caspases, principaux effecteurs. Les travaux proposés sont basés sur le développement de nouveaux outils pour l'étude des événements moléculaires de l'apoptose. La mise au point d'une nouvelle génération de biocapteurs "positionnels" permettant de mesurer l'activité de la caspase 3, dans des cellules vivantes au cours de l'apoptose. Ainsi le transfert industriel de ces capteurs pour leur exploitation sur une station robotisée de criblage en cytométrie en flux à haut débit. Ils ont été exploités pour disséquer les voies de signalisation de l'apoptose à travers une approche bi-oaramétrique d'analyse par imagerie confocale, des cinétiques intracellulaires des événements clés de la phase effectrice de l'apoptose. Ainsi le capteur à caspase 3 a été utilisé lors de la caractérisation d'un modèle particulier de mort cellulaire induite par stress oxydatif.

  • Titre traduit

    Development of a novel generation of recombinant fluorescent biosensors for measuring the activity of caspases within living cells during apoptosis


  • Résumé

    Apoptosis is a genetically programmed process of cell death, which, if non-functional, can lead to the formation of cancerous tumors. A key element of apoptosis in the activation of its principal effector, the caspases. The proposed work is based on the development of novel tools for the study of molecular mechanisms of apoptosis. The perfection of a new generation of "positioned" biosensors, allowing to measure the activity of caspase 3 in living cells undergoing apopotosis, as well as the industrial transfer of these sensors for their exploitation on a robotic station for High Content Screening. They were used for dissecting the apoptotic signalling pathways through a bi-parametrical approach of analysis by confocal imaging of intracellular kinetics of the effector part of apoptosis. Furthermore, the sensor of caspase 3 was employed for the characterization of a specific model of cell death, induced by oxidative stress.

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Informations

  • Détails : 1 vol.(253 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 271 réf..Annexes.

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  • Bibliothèque : Université de Bordeaux. Direction de la Documentation. Bibliothèque des Sciences du Vivant et de la Santé.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : CMTB 2006-1319
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