Protéomique de stades infectants du parasite aviaire Eimeria tenella-sub-protéomique et biologie des globules réfringents

par Patrick de Venevelles

Thèse de doctorat en Immunologie anti-parasitaire

Sous la direction de Pierre Péry.

Soutenue en 2005

à Versailles-St Quentin en Yvelines .


  • Résumé

    Les coccidioses représentent un problème pathologique majeur dans les élevages intensifs aviaires. La recherche de nouveaux antigènes induisant une réponse immune chez l'animal est primordiale face à l'apparition de chimiorésistances contre l'ensemble des anti-coccidiens utilisés actuellement. Dans cette optique, les objectifs de ce travail furent d'une part l'établissement des cartes des profils d'expression des protéines des formes invasives du parasite et d'autre part l'étude de la biologie et la définition du protéome de structures atypiques appelés globules réfringents. Les protéines exprimées dans les sporozoïtes ont été séparées par 2-DE dans les gammes de pH 3-10 et 4-7. Les 160 protéines les plus abondantes sur ces cartes ont été analysées en spectrométrie de masse simple et en tandem. L'enrichissement des banques de données d'E. Tenella (génome et transcrits) a permis l'identification de nouvelles protéines. Les cartes 2-D des protéines parasitaires apparaissent également comme un outil rapide pour définir de nouvelles cibles antigéniques. Les protéines de GR purifiés à partir des sporozoïtes ont ensuite été séparées par 2-DE. Les cartes de référence des protéines de sporozoïtes ont permis de déterminer les protéines localisées au sein des GR par comparaison de l'abondance des protéines entre les deux cartes 2-D. Dix sept protéines ont pu ainsi être définies comme appartenant aux GR et 16 autres protéines pourraient également les constituer. L'étude de la biologie de ces structures a montré qu'elles semblent jouer un rôle dans l'invasion ou le développement précoce ainsi qu'un rôle de réservoir de protéines pour l'invasion des formes libres plus tardives.

  • Titre traduit

    Proteomic studies of invasive forms of the avian parasite Eimeria tenella-sub-proteomics and biology of the refractile bodies


  • Résumé

    Coccidiosis is a major protozoan parasitic disease of poultry. The research of new targets for the development of a recombinant vaccine is fundamental to fight against the appearance of a chemoresistance against all the drugs actually used in intensive breedings. In this thesis, our aims was to caracterize the expression profiles of proteins of the invasive forms of the parasite and to study the biology and the proteome of Eimeriidae specific structures called refractile bodies. The sporozoïte proteins were resolved by 2-DE in the pH ranges 3-10 and 4-7. Then the 160 most abundant sporozoite proteins were systematically analysed and identified by MS or MS/MS. The databases for this parasite were considerably increased with many EST sequencing projects and the complete sequencing of the E. Tenella genome. These databases has allowed us to identify new proteins by MS/MS. The 2-D maps of proteins of the invasive forms has allowed us to define proteins which generate an immune response following an infection by E. Tenella and appear like a powerful tool for the detection of new targets. The refractile bodies were purified from sporozoites and their proteins were resolved by 2-DE. By comparison with the sporozoite reference maps, we have defined 17 proteins belonging to the refractile bodies. Sixteen more proteins could be considered as refractile body proteins but this remains to be verified. In the invasion of the sporozoite or in the precocious development of the parasite. The refractile bodies could be protein stocks which seem to play a role in the invasion steps of merozoites.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (190 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 356 réf. Bibliogr. p.166-190

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  • Bibliothèque : Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines. Direction des Bibliothèques et de l'Information Scientifique et Technique-DBIST. Bibliothèque universitaire Sciences et techniques.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 572.5 VEN
  • Bibliothèque : Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines. Direction des Bibliothèques et de l'Information Scientifique et Technique-DBIST. Bibliothèque universitaire Sciences et techniques.
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  • Cote : T050006
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