Etude de la fonction du récepteur aux opioïdes delta par modification génétique chez la souris

par Grégory Scherrer

Thèse de doctorat en Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie

Sous la direction de Brigitte Kieffer.

Soutenue en 2005

in l'Université Louis Pasteur (Strasbourg) .


  • Résumé

    Le système opioïde est un système neuromodulateur composé des récepteurs mu, delta et kappa et de leurs ligands peptidiques endogènes. Il régule de très nombreuses fonctions centrales et périphériques, notamment le contrôle de la douleur et les réponses émotionnelles. L’objectif de ce travail était de contribuer à la compréhension de la fonction du récepteur aux opioïdes delta. La stratégie reposait sur l’établissement et l’étude de souris génétiquement modifiées. Dans la première partie de ce travail, nous avons analysé le comportement de souris déficientes en récepteur delta dans des modèles de douleur, d’anxiété, de dépression et de mémoire. Nous avons pu définir quelle est l’implication du récepteur delta dans le contrôle de la douleur aiguë thermique et mettre en évidence sa participation dans les processus de mémorisation contextuelle. Dans la seconde partie de ce travail, nous avons établi une lignée de souris floxées pour le gène codant pour le récepteur delta (dor). Ces animaux expriment des récepteurs delta fonctionnels à un taux physiologique, et permettront, par expression régio-spécifique de la recombinase Cre, d’invalider le gène dor puis d’étudier la fonction du récepteur dans les différentes sous-populations neuronales où il est exprimé. Enfin, dans la troisième partie de ce travail, nous avons généré et analysé une lignée de souris exprimant un récepteur delta fusionné à la protéine fluorescente verte GFP. La visualisation directe de delta sur des sections de tissu a révélé sa distribution et sa localisation subcellulaire, et permis la caractérisation des neurones dans lesquels il est exprimé. Le trafic intracellulaire du récepteur a également été étudié, à la fois sur des coupes de tissu et en temps réel dans des cultures primaires de neurones. Ceci a permis d’évaluer in vivo l’incidence des propriétés dynamiques et de la répartition subcellulaire du récepteur sur son activité.

  • Titre traduit

    Study of delta opioid receptor function through mutagenesis in mouse


  • Résumé

    The opioid system is a neuromodulator system composed of mu, delta and kappa opioid receptors, and their endogenous peptidic ligands. The opioid system regulates numerous central and peripheral functions such as pain control and emotional responses. The goal of this work was to better understand delta opioid receptor function. The strategy relied on the study of mutant mice. In the first part of this work, we analyzed the behaviour of mice deficient for delta opioid receptors in several models of pain, anxiety, depression and memory. We managed both to clarify the involvement of delta opioid receptors in the control of acute thermal pain, and to reveal its participation to mechanisms underlying processing of contextual memory. In the second part of this work, we have established a mouse line harbouring a floxed delta opioid receptor gene. These animals, which express functional delta opioid receptors at physiological levels, will be useful to study the function of delta opioid receptors expressed in different brain structures through local gene invalidation gene by region-specific expression of the Cre recombinase. Finally, in the third part of this work, we have both generated and analyzed a mouse line expressing delta opioid receptors fused to the green fluorescent protein GFP. Direct visualization of delta on brain slices revealed its distribution and subcellular localization and allowed characterization of delta expressing neurons. Receptor trafficking was also studied, on tissue sections as well as in real-time on primary cultures, to reveal relationship existing between dynamic properties and subcellular localization of delta opioid receptors and their activity in vivo.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (200 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 175-196

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  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Blaise Pascal.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.2005;5002
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