Capteurs et biocapteurs pour l'analyse par injection en flux

par Bogdan Bucur

Thèse de doctorat en Agrochimie

Sous la direction de Andrei Florin Danet et de Jean-Louis Marty.

Soutenue en 2005

à Bucarest en cotutelle avec l'Universitatea Bucuresti , dans le cadre de École doctorale Énergie environnement (Perpignan) .


  • Résumé

    Ce travail a pour objet la mise au point de (bio)capteurs utilisables dans des systèmes d'analyse en flux. L'AChE a été choisie comme bio récepteur biologique pour la mise au point des méthodes sensibles pour la détection des insecticides neurotoxiques. Deux axes principaux de recherche ont été suivis : (i) la mise au point des nouvelles méthodes d'immobilisation de l'AChE basées sur des liaisons de bioaffinité (ii) l'utilisation des enzymes provenant de différentes origines ou modifiées génétiquement pour améliorer la sensibilité et la sélectivité des analyses. Les biocapteurs développés dans cette thèse ont été mis au point et optimisés dans des systèmes appelés " batch " ou utilisés couplés avec les techniques d'analyse en flux. L'immobilisation par affinité de l'AChE d'une manière originale a été réalisée en utilisant la Con A (une lectine) qui peut se lier avec les sucres se trouvant à la surface de l'enzyme. Les deux méthodes proposées permettent l'immobilisation orientée de l'AChE, l'élimination des barrières de diffusion, la réutilisation des transducteurs. . . L'utilisation des enzymes provenant des organismes différents permet la construction de biocapteurs avec des performances améliorées. Ce travail a permis la mise au point de biocapteurs très sensibles pour la détection des insecticides carbamates grâce à l'utilisation de trois mutants de Dm. En plus, il a été proposé un système d'analyse en flux capable de faire la différence entre les inhibitions produites par des insecticides et d'autres composés. Au vu les résultats obtenus, nous pouvons envisager des applications potentielles études dans le domaine du monitorage de l'environnement.

  • Titre traduit

    Sensors and biosensors for flow injection analysis


  • Résumé

    This work was focused on the development of (bio)sensors for the flow injection analysis. The AChE was chosen as biocomponent for the realisation ofbiodevices, which are sensitive towards neurotoxic insecticides. Two main research directions were followed in this study: (i) the realisation of new methods for AChE immobilisation based on bioaffinity links (ii) the use of enzymes that are obtained from different sources or genetically modified toimprove the sensitivity and the selectivity of the determinations. The biosensors developed in this thesis were studied and optimised in " batch " systems or used coupled with flow analysis techniques. The bioaffinity AChE immobilisation in an original manner was carried out with Con A (a lectine) that interacts with the sugars present on the surface of the enzyme. The immobilisation is performed in several independent steps and produce a sandwich like structure in which the Con A makes a bridge between the AChE and the support activated by a sugar. The two proposed methods allowsthe oriented immobilisation of the AChE, the elimination of the diffusion barriers, the reuse of the transducers. . . The use of the enzymes from different organisms allows the construction of biosensors with improved performances. In this thesis, we constructed biosensors highly sensitive towards the carbamate insecticides by using three mutants of Dm. Also, it was proposed a flow analysis system able to differentiate between the inhibitions produced by the insecticides or by interfering compounds Considering the obtained results, the biosensors could be successfully used for environmental monitoring.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (XII-158 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 140-149 f.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Perpignan Via Domitia. Service commun de la documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH 2005 BUCU
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