Utilisation des peptides cationiques minimalistes dans la vectorisation des oligonucléotides antisens : étude aux niveaux cellulaire et moléculaire

par Fatima-Zohra Boukhalfa-Heniche

Thèse de doctorat en Biophysique moléculaire

Sous la direction de Mahmoud Ghomi.

Soutenue en 2005

à Paris 13 .

  • Titre traduit

    ˜ œCompaction and vectorization of naturel and modified oligonucleotides with leucine- and lysine-rich peptide : study at molecular and celular levels


  • Résumé

    Ce travail s'inscrit dans le cadre de la stratégie antisens: l'intemalisation dans cellule d'un oligodesoxyribonucleotide (ODN)de sequence courte et opposee, conduit à son hybridation avec l' ARNm cible pour former un duplexe inhibant la traduction de la protéine d'interet. Neanmoins, cette stratégic se heurte à deux problèmes majeurs: la dégradation nucléasique des ODNs et la faible permeabilité membranaire pour de telles molécules. Cependant ces difficultés peuvent être surmontées en utilisant des modifications chimiques sur les ODNs et des systèmes moléculaires permettant leur pénétration intracellulaire. Ces deux points ont été étudiés à l’ aide i) d'une boucle ultrastable à l’extremité 3' des ODNs phosphodiester et/ou phosphorothioate, et ii) de peptides cationiques minimalistes comme vecteurs. Ces derniers ont été choisis dans les familIes LiKj (i=2j) et (KL )mK, respectivement " Ie 15-mere amphipathique L10K5 et les 9-mere et 15-mere L4K5 et L78. L'internalisation intracellulaire et l'effet antisens d'ODNs ciblant I' ARNm du gene MDRl humain codant la P-glycoproteine ont été evalués sur des cellules de gliome humain, par cytométrie en flux et imagerie de fluorescence. Dans les deux cas,. Le resultat le plus significatif a été obtenu. Avecle peptide LlOKS. Par ailleurs, les propriétés conformationelles des peptides en solution ainsi que la determination des sites d'interaction rnoleculaires dans les complexes ont été élucidées par spectroscopie optique (dichroisme circulaire et diffusion Raman); les effets marquants observés sont : la perturbation de la structure secondaire, peptide L10K5 et l'effet structurant de celui-ci quand il interagit avec l'ODN.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 182 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. RB-1--RB14

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Paris 13 (Villetaneuse, Seine-Saint-Denis). Bibliothèque universitaire. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TH 2005 007
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.