Rôle de la protéine Crb2 dans les systèmes de surveillance de l'intégrité du génome chez Schizosaccharomyces pombe

Role of the Crb2 protein in checkpoint systems responsible for genome integrity

• Auteur / Autrice : Ada Collura
• Direction : Giuseppe Baldacci, Stephania Francesconi
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Paris 11
• Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne)

Mots clés

Mots clés libres

Dommage de l'ADN

Stress génotoxiques

Cycle cellulaire

Chromatine

Résumé

En présence de lésions de l'ADN ou de perturbations dans la phase de réplication ou encore dans l'attachement des microtubules aux centromères pendant la mitose, les cellules de S. Pombe comme toutes les cellules eucaryotes, induisent l'activation du système de surveillance de la réparation, de la réplication et du fuseau mitotique. La fonction de ces systèmes de surveillance est d'inhiber ou de ralentir la progression du cycle cellulaire si une anomalie dans un de ces processus cellulaires est détectée. Ceci permettra à la cellule de résoudre le problème rencontré sans que la transmission de l'information génétique d'une cellule mère aux cellules filles soit mise en péril. . Au cours de mon travail de thèse, j'ai étudié, d'une part l'allèle Dset1 de S. Pombe, déficient dans la méthyltransferase spécifique de la lysine 4 de l'histone H3, en analysant l'effet de mutations des gènes checkpoint en réponse à différents traitements génotoxiques de la souche Dset1. D'autre part, je me suis intéressée à la caractérisation d'une nouvelle fonction de la protéine Crb2 de S. Pombe. La protéine Crb2 est la protéine nécessaire pour l'activation de la kinase Chk1 en réponse à l'activation du checkpoint de la réparation. Dans cette activation elle joue le rôle de protéine adaptatrice, permettant le recrutement de Chk1 à proximité de la kinase Rad3 afin que la phosphorylation de Chk1 par Rad3 soit efficace. Crb2 est aussi nécessaire pour la survie cellulaire en réponse à l'exposition chronique à l'hydroxyurée ou en cas d'inhibition des ADN polymérases.

The appearance of DNA lesions or problems during the replicative phase or during microtubule attachment to centromeres during mitosis in Schizosacharomyces pombe, like in all other eucaryotes, all result in the activation of checkpoint systems responsible for DNA repair, and for correct DNA replication and mitotic spindle assembly. When anomalies in one of these cellular processes are detected, the different checkpoint systems can nhibit or retard cell cycle progression, thus allowing the cell machinery to repair the problem encountered without affecting the transmission of genetic information to the daughter cells. During my PhD, I have studied, on one hand, the Dset1 allele of S. Pombe, an allele which is deficient in methyltransferase activity towards lysine 4 of the histone H3. More specifically, I have studied the effect of mutations in checkpoint genes on the response of the Dset1 strain to different genotoxic treatments. I have also investigated a new function assigned to the Crb2 protein of S. Pombe. This protein is essential for the activation of the Chk1 kinase after induction of the DNA repair checkpoint. In this pathway Crb2 plays the role of an adapter, recruiting Chk1 to the vicinity of the Rad3 kinase, thus enhancing Chk1 phosphorylation by Rad3. The Crb2 protein is also necessary for cell survival in response to chronic exposure to hydroxyurea or to DNA polymerase inhibition.