L' entomophathogène Bacillus thuringiensis : identification d'un nouveau sérovar, persistance des spores et implication des métalloprotéases dans le pouvoir pathogène

par Myriam Hajaij

Thèse de doctorat en Microbiologie et virologie

Sous la direction de Didier Lereclus et de Abdellatif Boudabous.

Soutenue en 2005

à Paris 7 .


  • Résumé

    Bacillus thuringiensis est une bactérie sporulante à Grain-positif, phylogénétiquement très proche de Bacillus cereus. Elle doit ses caractères entomopathogènes à la synthèse de nombreuses δ-endotoxines. Dans le cadre de la recherche de nouvelles toxines Cry de B. Thuringiensis, nous avons isolé et caractérisé un nouveau sérovar H»71 de B. Thuringiensis, désigné par B, thuringiensis var, jordanica Nous nous sommes aussi intéressés à Timpact de l'application de la formulation de spores et cristaux de B. Thuringiensis serovar. Israelensis (VectoBac®) dans un biotope à moustiques en Grande Camargue (France). Les gènes codant pour des métalloprotéases putatives de type InhA et Enhancine ont été détectés chez B, cereus par analys de la séquence génomique. Nos travaux ont porté sur la purification et la caractérisation biochimique de ïnhA2, ainsi que sur sa contribution à la virulence de B. Thuringiensis. Nous avons démontré qu'elle dégrade la caséine, le collagène, l'actine et Falbumine parmi d'autres substrats testés. Elle est stable en présence d'ion Ca-HK La protéine InhA2 pure n'a pas d'effet direct sur la mortalité par voie orale. En revanche, elle semble interagir avec le système immunitaire inné de l'insecte : elle provoque la production de nodules mélanisés chez les larves de G. Mellonella, elle dégrade la cécropine, peptide antimicrobien synthétisé par le système immunitaire des larves d'insectes. Nous avons identifié un second gène codant pour une métalloprotéase. Il a été désigné par mpbE (Métalloprotéase Bacillus Enhancin). Nous avons démontré qu'il est est positivement régulé par ractivateuï transcriptionnel pléitrope PleR. MpbE porte la signature HEIAH.

  • Titre traduit

    The entomopathogenic bacteria Bacillus thuringiensis : identification of a new serovariety, persistence of spores and implication of metalloproteases in pathogenicity


  • Résumé

    Bacillus muringiensis is a Gram-positive spore-forming bacterium closely related to Bacillus cereus and both are ubiquitous to various environments. The entomopathogenic properties of B. Thuringiensis are mainly due to the δ-endotoxines. In the search for new B. Thuringiensis Cry toxins, we have isolated and characterized the new serovar H-71, named B. Thuringiensis serovar, jordanica. In a second aspect, we studied the possible impact of large scale treatments with a spore/crystal formulation (VectoBac®) of B. Thuringiensis serovar. Israelensis (Bti) in a mosquito breeding site in Grande Camargue (France). Genes encoding two putative zinc-metalloproteases of type InhA and Enhancin were found in a sequenced genome of B. Cereus strain ATCC14579. Then, our work has been based on purification, biochemical charaeterization and contribution of MiA2 in the virulence de B. Thuringiensis. . We show that InhA2 hydrolyses several substrates, like caseine, collagen, actin and albumine. Pure InhA2 dœs not provide direct mortality by oral route; meanwhile, it seems to interact with insect innate immunity. In addition it also dégrades cecropin, an anti-microbial peptide. We also investigated on a second metalloprotéase, encoded by a gene we named mpbE (Metalloprotease Bacillus Enhancin). We demonstrate its positive activation by the transcriptional regulator PlçR. MpbE carry a typical HEIAH signature.

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Informations

  • Détails : 1 vol. ([158] f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 363 réf.

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  • Bibliothèque : Université Paris Diderot - Paris 7. Service commun de la documentation. Bibliothèque Universitaire des Grands Moulins.
  • PEB soumis à condition
  • Cote : TS (2005) 219
  • Bibliothèque : Bibliothèque interuniversitaire de santé (Paris). Pôle pharmacie, biologie et cosmétologie.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : MFTH 9468
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