Recherche d'évènements moléculaires associés à la morphogenèse précoce de la baie de vigne au travers de l'analyse du mutant "fleshless berry" (V. Vinifera. L)

par Lucie Fernandez

Thèse de doctorat en Biologie des systèmes intégrés

Sous la direction de Françoise Dosba.

Soutenue en 2005

à Montpellier, ENSA .


  • Résumé

    En relation avec l'étude de la morphogenèse de la baie de vigne, ce travail a été réalisé en s'appuyant sur la mutation flb (fleshless berries) découverte chez Vitis vinifera cv. Ugni Blanc. Cette mutation, de nature dominante, entraîne une altération précoce et profonde de la croissance du péricarpe charnu. La technique d'analyse de ségrégation en mélange et l'utilisation de marqueurs microsatellites, ont permis de localiser le locus flb sur le groupe de liaison 18 à 5,6 cM du marqueur le plus proche. Une recherche des gènes régulés entre le mutant flb et le génotype sauvage a été effectuée à la fois par une approche de type gène-candidat focalisée sur l'étude de quelques gènes de la famille MADS-box et par une analyse systématique du transcriptome, via l'utilisation de puces à ADN 3K et la construction de banques soustractives par la technique du SSH. La description globale des catégories fonctionnelles issues de ce criblage s'est poursuivie par une caractérisation plus approfondie de l'expression tissulaire de quelques cibles. Ce travail a débouché sur l'identification de gènes impliqués potentiellement dans la morphogenèse précoce des baies, dont 3 facteurs de transcription et 2 protéines de fonction moléculaire inconnue en cours de validation fonctionnelle par génétique inverse.

  • Titre traduit

    Investigation of molecular events linked to early berry morphogenesis through analysis of the "fleshless berry" mutant (V. Vinifera L. )


  • Résumé

    In order to study early fruit morphogenesis in grapevine, we investigated the fleshless berry (flb) mutant (Vifis vinifera L. Cv Ugni Blanc), which is unable to specify ovary cell fate later in fleshy pericarp development. Through Bulk Segregant Analysis, microsatellite (SSR) markers linked to this dominant mutation were identified and the flb locus was assigned to linkage group 18 at best at 5. 6 cM to the closest marker. Isolation of genes regulated between the flb mutant and the wild-type was performed through a candidate gene analysis focused on the MADS-box gene family and through a high-throughput expression screening using 3K microarray analysis and Suppression Subtractive Hybridization. After a global description of the main functional categories affected by the mutation, the tissue specificity of some candidate genes have been further investigated. This work revealed five genes likely involved in the regulation of early grapevine fruit morphogenesis, 'among them 3 transcriptional factors and 2 unknown molecular function proteins, currently characterized through reverse genetics for their function in plant.

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Informations

  • Détails : 1 vol. ( 173 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. 412 réf.

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