Études fonctionnelles et structurales d'un transporteur membranaire de multiples drogues et de deux saccharose isomérases bactériennes

• Auteur / Autrice : Stéphanie Ravaud
• Direction : Richard Haser
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Lyon 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Édulcorants

Cristallographie

Résistance multiple aux médicaments

Protéines membranaires

Transporteurs ABC

Résumé

La protéine membranaire BmrA de Bacillus subtilis est un transporteur ABC (ATP-binding cassette) impliqué dans les phénomènes de résistance à de multiples drogues. Son protocole de purification a été optimisé afin de l'adapter aux exigences d'une étude cristallographique et une caractérisation détaillée du complexe protéine-détergent-lipides purifié a été réalisée par diverses méthodes biophysiques. Parallèlement, des essais de cristallisation ont été menés sur la protéine sauvage et sur un mutant inactif. Les saccharose isomérases MutB de P. Mesoacidophila MX-45 et SmuA de P. Rubrum catalysent l'isomérisation du saccharose en isomaltulose et tréhalulose, deux édulcorants au fort potentiel nutritionnel et industriel. Les deux enzymes ont été cristallisées et de nombreuses structures de MutB native et de mutants, en complexe avec divers inhibiteurs ou avec le substrat naturel, ont été résolues nous permettant d'analyser les mécanismes et spécificités des réactions catalysées