Fonctions et cibles du facteur de transcription RFX chez Drosophila melanogaster

par Raphaëlle Dubruille

Thèse de doctorat en Génétique moléculaire

Sous la direction de Bénédicte Durand.

Soutenue en 2005

à Lyon 1 .


  • Résumé

    Au laboratoire, nous nous intéressons à une famille restreinte des facteurs de transcription appelés RFX. Nous étudions en particulier les fonctions physiologiques de deux d'entre-eux : RFX chez Drosophila melanogaster et RFX3 chez Mus musculus. Je me suis attachée à dégager la fonction de RFX chez la drosophile. Dans un premier temps, j'ai caractérisé deux allèles mutants obtenus au laboratoire. L'allèle Rfx49 porte une délétion qui abolit l'expression de la protéine et l'allèle dRfx253 porte une mutation ponctuelle dans le domaine de liaison à l'ADN, engendrant la production d'une protéine incapable de lier l'ADN. L'étude comportementale des mutants pour Rfx a révélé un dysfonctionnement de toutes les fonctions sensorielles, à l'exception de la vue, en accord avec l'expression de Rfx dans tous les neurones sensoriels ciliés. Par microscopie électronique à transmission, j'ai montré que les neurones sensoriels présentent des défauts morphologiques. Le cil normalement présent à l'extrémité dendritique des neurones sensoriels est absent. Afin de mieux comprendre la fonction de RFX, j'ai entrepris dans un second temps d'identifier les gènes dont l'expression est régulée par RFX. Pour cela, j'ai développé plusieurs approches. La première a consisté à sélectionner des gènes candidats décrits comme impliqués dans la ciliogenèse ou dans la perception sensorielle. Cette sélection a été complétée par la recherche, dans les séquences promotrices des gènes candidats, de la séquence de liaison à l'ADN des facteurs RFX, la boîte X. En parallèle de ces deux approches, j'ai entrepris d'identifier les gènes cibles de RFX par la technique de PCR soustractive. Les gènes candidats ainsi sélectionnés ont été validés par PCR quantitative en temps réel. À ce jour, j'ai identifié une quinzaine de gènes cibles de RFX. Tous sont impliqués dans la structure ou la fonction des cils sensoriels. Ces travaux montrent que RFX est un régulateur essentiel de la ciliogenèse dans les neurones sensoriels de la drosophile. L'identification de ces gènes cibles permet de préciser la fonction de RFX dans ces neurones

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Informations

  • Détails : 1 vol. (118 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : 167 réf. bibliogr.

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université Claude Bernard (Villeurbanne, Rhône). Service commun de la documentation. BU Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : T50/210/2005/13bis
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