Etude de Pan A et de Pan B : deux protéines régulatrices du protéasome chez les archaea halophiles

par Hala Chamieh

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de Bruno Franzetti.

Soutenue en 2005

à Grenoble 1 .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Les protéasomes sont de larges protéases ATP-dépendante impliquées dans la dégradation des protéines régulatrices et des protéines anormales dans la cellule. Cette thèse porte sur l'étude de deux AAA-ATPases : Pans A et Pans B régulatrices du protéasome chez les archaea halophiles. Une partie de ce manuscrit est consacrée à la caractérisation du mode de régulation des deux Pans chez l'Archaea halophile extrême Halobacterium salinarium. Les expériences montrent l'existence de deux isoformes des protéines Pans dans les cellules. Les modifications portent sur la région N-ter des deux protéines et mettent probablement en jeu l'utilisation alternative de deux départs de traduction. La cartographie des régions 5' non codantes des transcrits révèle l'existence d'une hétérogénéité au niveau des ARNm des pans. Le travail s'intéresse ensuite aux états d'oligomérisation et d'association in cellulo des protéines PANs. Des études de fractionnement par ultracentrifugation sur gradient de sucrose indiquent un état de faible oligomérisation des PANs et l'absence de complexes stables avec le protéasome 20S. La dernière partie du travail porte sur la régulation de l'expression des gènes panA et panB au cours de la réponse aux stress salin et thermique. Ce travail montre que les deux protéines Pans, activatrices potentielles du protéasome, ne sont pas régulées de façon identique en réponse à un stress environnemental.

  • Titre traduit

    Characterisation of Pan A and Pan B : two proteasomal regulatory proteins from the halophilic archaeon


  • Résumé

    Proteasomes are large ATP-dependent proteases implicated in degradation of key regulatory cellular proteins and abnormal cellular proteins. The current work is the first characterization of two AAA-ATPase proteasomal regulatory proteins PAN A and PAN B in halophilic archaea. The first part of the manuscript characterizes the mode of regulation of the two PANs in the extremely halophilic archaoen Halobacterium salinarium. Our experiments show the existence of two isoforms of each PAN proteins in the cells. The two isoforms differ in their N-terminal regions and result probably from the use of two alternative transcription start sites. Primer extension methods demonstrate the existence of heterogeneity in PAN's mRNA as revealed by mapping of the 5' non coding regions. The second part of the manuscript shed lights on oligomerisation and association of the PAN proteins in cellulo. Fractionation of cell free extracts on sucrose gradients indicates a weak degree of oligomerisation of the PANs and the absence of stable complexes with the proteasome 20 S. The last part of this work focuses on the regulation of PAN A and PAN B gene expression in response to stress including heat shock and salt shock. Our results clearly show that the two proteasome activating proteins are not regulated in a similar way in response to environmental stress

Autre version

Cette thèse a donné lieu à une publication en 2006 par [CCSD] [diffusion/distribution] à Villeurbanne

Etude de Pan A et de Pan B : deux protéines régulatrices du protéasome chez les archaea halophiles

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Informations

  • Détails : 1 vol. (160 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 149-160

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  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire Joseph-Fourier.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TS05/GRE1/0231
  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire Joseph-Fourier.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS05/GRE1/0231/D
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