Dysfonctionnement de la NADPH oxydase des phagocytes dans la granulomatose septique chronique de type X+ : Modèle d'étude : les cellules PLB-985 CGD X

par Xing Jun Li

Thèse de doctorat en Biologie

Sous la direction de Marie-José Stasia et de Françoise Morel.

Soutenue en 2005

à l'Université Joseph Fourier (Grenoble) .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    La mutagénèse dirigée et la transfection stable dans le modèle cellulaire X-CGD PLB-985 ont été utilisées pour étudier les mécanismes moléculaires du dysfonctionnement de l'oxydase dans 3 cas de CGD-X+ (H303N /P304R, D500G, L505R), 1 cas de X–-CGD (S193F) et le rôle de 2 domaines de Nox2 191TSSTKTIRRS200 et 484DESQANHFAVHHDEEKD500. Les mutations H303N, P304R et D500G inhibent l'assemblage et l'activité de l'oxydase. La mutation L505R diminue partiellement l'affinité de Nox2 pour NADPH et son interaction avec p67phox in vitro. Cependant cet acide aminé n'est impliqué dans la fixation directe du NADPH. La boucle D et la région (484-504) sont essentielles à l'activité oxydase. Seule la région C-terminale est impliquée dans l'assemblage de l'oxydase et le transfert électronique du NADPH vers FAD. La boucle D des Nox1/3/4 est fonctionnelle pour l'activité oxidase de Nox2. Le modèle-3D de la partie C-terminale de Nox2 confirme l'importance de l'hélice-alpha dans l'activation du complexe oxydase.


  • Pas de résumé disponible.

  • Titre traduit

    Study of the NADPH oxidase complex dysfunction in X+ chronic granulomatous disease – X-CGD PLB-985 cells as cellular model     


  • Résumé

    Mutagenesis approach and stable transfection in the X-CGD PLB-985 cellular model was applied to study the molecular mechanisms of oxidase dysfunction in three X+-CGD cases (H303N/P304R, D500G, L505R), one X–-CGD case (S193F) and the role of two potential cytosolic domains of Nox2 (191TSSTKTIRRS200 and 484DESQANHFAVHHDEEKD500). H303N, P304R and D500G inhibit the assembly and the activity of the oxidase complex. L505R mutation partially diminished the affinity of Nox2 for NADPH and p67phox in a cell-free system assay, but is not involved in the adenine of NADPH binding. The two studied regions are essential to maintain oxidase activity, while only residues 484-500 are associated with the oxidase assembly and electron transfer from NADPH to FAD. The D-loop of Nox1/3/4 is functional for Nox2. The 3D-model of the Nox2 C-terminal confirms that the importance of the alpha-helix loop (484-504) in the oxidase activation.

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Informations

  • Détails : 1 vol. (167 p.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 153-167

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  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire de Sciences.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TS05/GRE1/0123
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  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS05/GRE1/0123/D
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