Etude de l'organisation de films ultraminces de protéines par microspectroscopie Raman et autres techniques

Study of proteins organisation in ultrathin films by Raman microspectroscopy and others techniques

• Auteur / Autrice : Florent Sandras
• Direction : Jean-Marie Turlet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences physiques et de l'ingénieur. Lasers et matière dense
• Date : Soutenance en 2005
• Etablissement(s) : Bordeaux 1

Mots clés

Mots clés contrôlés

Surfactant pulmonaire

Langmuir-Blodgett, Couches de

Spectroscopie Raman

Résumé

Cette étude porte sur l'organisation en films ultraminces de protéines fortement tensioactives et sur leurs interactions avec des lipides. Elle a été réalisée principalement par microspectroscopie Raman confocale associée à d'autres méthodes complémentaires telles que des mesures de tension superficielle, la microscopie à l'angle de Brewster et la spectroscopie infrarouge PM-IRRAS. Le signal Raman de tels systèmes étant très faible, la première étage de ce travail a consisté à mener des tests comparatifs entre différents types de caméra CCD de technologies récentes afin d'optimiser la détection du montage. L'optimisation de notre instrumentation a permis l'étude de différents films protéiques. D'une part, des films de Langmuir constitués de protéines du surfactant pulmonaire SP-B ou SP-C ont été étudiés, les protéines étant pures ou en interaction avec deux phospholipides, le DPPC et le DPPG, présents majoritairement dans le système in-vivo. Ensuite, la puroindoline-a, protéine végétale dont les fortes propriétés tensioactives permettent la réalisation et la caractérisation de films noirs protéiques, a aussi été étudiée. Nous avons en particulier montré que cette protéine subit des changements importants de structure secondaire selon la nature du système étudié (poudre, solution aqueuse ou film noir). Des changements ont également été constatés en présence du lyso-palmitoylphosphatidylcholine (LPC), phospholipide à une seule chaîne aliphatique.