Etude du rôle du TNFα dans l'ischémie rétinienne chez le rat adulte : Approches in vivo et in vitro

par Céline Fuchs

Thèse de doctorat en Pharmacologie moléculaire et cellulaire

Sous la direction de Luc-Henri Tessier.

Soutenue en 2004

à l'Université Louis Pasteur (Strasbourg) .


  • Résumé

    L'ischémie rétinienne est un mécanisme physiopathologique majeur impliqué dans le glaucome ou encore la rétinopathie diabétique. Etant donné l'importance des processus inflammatoires dans l'ischémie, nous nous sommes intéressés à l'étude d'une cytokine : le TNF, libéré après un stress ischémique et dont le rôle reste encore très controversé. Notre travail a permis d'établir qu'au sein du tissu rétinien, le TNFα est synthétisé par les cellules gliales de Müller, aussi bien dans un modèle d'ischémie in vitro, que dans un modèle in vivo. Un de ces récepteurs de haute affinité, le TNF-R1 est exprimé par les cellules ganglionnaires in vivo et in vitro. L'utilisation de différents modèles de cultures démontre la dualité du rôle du TNF-R1. En effet, si le TNFα endogène, libéré dans les cultures mixtes de rétines au cours des processus ischémiques est toxique pour les cellules ganglionnaires, l'addition de TNF induit plutôt la survie de ces mêmes cellules en conditions normoxiques. Nous montrons aussi que ces deux effets opposés, sont dus spécifiquement à l'activation du TNF-R1. Dans un modèle de cultures pures (" immunopanning ") de cellules ganglionnaires, un traitement au TNFα entraîne la mort des cellules ganglionnaires. Cet effet toxique est inhibé par la présence de surnageant de cultures rétiniennes mixtes, suggérant ainsi, l'existence d'un facteur diffusible pouvant bloquer la voie apoptotique. Nos résultats montrent au niveau moléculaire que, le facteur de transcription NF-B, activé suite à l'engagement du TNF-R1, est le facteur clé intervenant dans le choix entre la mort ou la survie cellulaire des les cellules ganglionnaires. Nos résultats démontrent particulièrement l'implication de la protéine c-FLIP, synthétisée suite à l'activation de NF-B, dans le contrôle de la survie cellulaire. Ainsi, ce travail nous a permis de mieux comprendre les voies de transduction du TNF-R1 impliquées dans les cellules ganglionnaires.

  • Titre traduit

    Role of TNFα in retinal ischemia : Both in vivo and in vitro studies


  • Résumé

    Ischemia is a major pathophysiological mechanism occurring in retinal diseases such as glaucoma or diabetic retinopathy. Given that inflammation plays a central role in ischemia, role of cytokines-released under ischemic conditions have been considered. Whether TNF has been shown to exert either detrimental or protective effect in retinal ganglion cells (RGCs), the origin of theses conflicting results is not clearly understood. The aim of our work was thus to characterize the role of TNF on mammalian RGCs under ischemic conditions both at cellular and molecular levels. First, we demonstrated in both in vitro and in vivo ischemic models that TNF is synthesized in retinal Müller glial cells while its receptor, TNF-R1, is only express by RGCs. Secondly, TNF-R1 activation was found to exhibit dual effects in RGCs when investigated in mixed retinal cells cultures or in purified RGCs cultures. While TNF led to apoptosis in purified RGCs and in mixed retinal cell culture under ischemic conditions, TNF induced RGCs survival in mixed retinal cell culture in normoxic conditions. As demonstrated by pharmacological experiments, the neuroprotective effect induced by TNF-R1-activation in mixed cell culture conditions is mediated by the activation of the transcription factor NF-B. Interestingly, TNF failed to induce RGCs death in purified cells cultures in presence of mixed retinal cell culture conditioned medium. RT-PCR experiments finally, showed the induction of the c-FLIP mRNA synthesis in RGCs cultured with conditioned medium. Taken together, these results confirm that TNF-R1 activation can lead to either apoptotic or neuroprotective effect in RGCs. Moreover, they also demonstrated that the NF-B/c-FLIP pathway is implicated in survival versus death engagement of RGCs. This work also offers interesting perspectives since it suggests that other factors released by different retinal cell types may be implicated in the TNF-induced neuroprotective pathway in RGCs.

Consulter en bibliothèque

La version de soutenance existe sous forme papier

Informations

  • Détails : 1 vol. (Pagination multiple [142 f.])
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 89-104

Où se trouve cette thèse ?

  • Bibliothèque : Université de Strasbourg. Service commun de la documentation. Bibliothèque Blaise Pascal.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : Th.Strbg.Sc.2004;4677
Voir dans le Sudoc, catalogue collectif des bibliothèques de l'enseignement supérieur et de la recherche.