Rôle de la myosine IB durant la phagocytose chez Entamoeba histolytica

par Sabrina Marion

Thèse de doctorat en Sciences biologiques. Biologie moléculaire de la cellule

Sous la direction de Nancy Guillén.


  • Résumé

    Entamoeba histolytica, parasite de l'homme, est l'agent étiologique de l'amibiase. Plusieurs caractéristiques jouent un rôle majeur dans la dissémination de ce parasite dans l'organisme, comme sa mobilité ou sa capacité à ingérer les cellules humaines par phagocytose. Nos travaux de recherche visent d'une part, à comprendre les mécanismes par lesquels E. Histolytica reconnaît la cellule humaine et active le processus de phagocytose et d'autre part, à identifier les molécules parasitaires qui interviennent durant ce phénomène. Nous nous sommes plus particulièrement intéressés à comprendre la régulation de la myosine IB, le moteur moléculaire qui fournit l'énergie permettant la formation de la vacuole de phagocytose. Nous avons montré que la myosine IB, par une activité de pontage des filaments d'actine, joue un rôle majeur de structuration du réseau d'actine. Cette activité paraît réguler la densité du cytosquelette cortical et ainsi, la flexibilité de la membrane plasmique lors de l'émission des pseudopodes de phagocytose. D'autre part, nous avons purifié les phagosomes à l'étape transitoire de vacuole de phagocytose. Les protéines présentes sur les phagosomes précoces des souches sauvages et surproduisant la myosine IB (MyoIB+) ont été identifiées par spectroscopie de masse en tandem. Cette étude a permis de définir les acteurs moléculaires chez E. Histolytica participant aux événements de signalisation et à l'activité du cytosquelette d'actine durant le processus d'internalisation. De plus, la comparaison entre les phagosomes des souches sauvages et MyoIB+ a permis d'identifier des protéines dont l'activité serait liée à celle de la myosine IB durant la phagocytose.


  • Résumé

    Phagocytosis of human cells by the human parasite E. Histolytica is a crucial activity for the invasive process of the host tissues. Myosin IB, the unique unconventional myosin of E. Histolytica, is the molecular motor providing forces to deform the plasma membrane to engulf human cells. During my PHD, I characterized the biophysical properties of myosin IB in living parasites and showed that this molecule can cross-link actin filaments and thereby regulate the viscoelastic properties of the cortical actin gel. This property appeared important for the dynamics of the membrane deformation at the first step of the phagocytic process. Furthermore, I used a proteomic approach to dissect the early signaling events involved in the activity of the cytoskeleton during phagocytosis. I purified phagosome at different time point of the uptake process and identified the phagosomal proteins by mass spectroscopy. We identified 600 proteins involved in cytoskeleton activity, signaling pathways, lytic factors and new putative receptors. Furthermore, comparing the phagosomal proteins of early phagosomes purified from the wild type cells and parasites that overproduce myosin IB, we identified putative candidates, which the activity is linked to myosin IB function during the first steps of the phagocytic process in E. Histolytica.

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Informations

  • Détails : 263 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p.98-109

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  • Bibliothèque : Université Paris-Sud (Orsay, Essonne). Service Commun de la Documentation. Section Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 0g ORSAY(2004)142
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