Métabolisme saccharidique chez les bifidobactéries : approche biomoléculaire des enzymes de phosphorylation

par Iuliana Cristina Caescu

Thèse de doctorat en Sciences de la vie et de la santé

Sous la direction de Vlad Artenie et de Stéphane Bouquelet.

Soutenue en 2004

à Lille 1 en cotutelle avec l'Universitatea Alexandru Ioan Cuza (Iaşi, Roumanie) .


  • Résumé

    Ce travail démontre que le produit du gène frK est une fructokinase (EC 2. 7. 1. 4) et prouve que cette protéine est l'enzyme nécessaire et suffisante pour l'intégration du fructose dans la voie de la F6PPK chez Bifidobacterium longum A1OC. Le gène frK codant pour cette enzyme a été identifié par analyse bioinformatique. Une analyse biochimique révèle que la protéine recombinante FrK est très spécifique du fructose, avec une affinité équivalente pour les deux substrats (saccharidique et nucléotidique). Deux types d'approches (génétique, RT-PCR semi-quantitative et biochimique, mesure de l'activité fructokinase des cellules cultivées en milieu minimum contenant différentes sources de carbone) nous ont permis de démontrer que l'expression de frK est induite par le fructose et réprimée par le glucose. Une analyse génotypique de la souche type B. Longum DSM20219 nous a permis de mettre en évidence que cette souche présente une délétion chromosomique d'environ 3,3 Kb contenant l'intégralité du gène frK, responsable du phénotype Fru- observé.

  • Titre traduit

    Carbohydrate metabolism in bifidobacteria : molecular approach of the enzymes involved in phosphorylation


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Informations

  • Détails : 1 vol. (203 f.)
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 180-203

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  • Bibliothèque : Université des sciences et technologies de Lille (Villeneuve d'Ascq, Nord). Service commun de la documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 50376-2004-71
  • Bibliothèque : Université des sciences et technologies de Lille (Villeneuve d'Ascq, Nord). Service commun de la documentation.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 50376-2004-72
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