Contribution à l'étude des effets de l'hypoxie sur le métabolisme hépatique : adaptation de la périfusion d'hépatocytes isolés de rat.

par Emmanuel Marusczak

Thèse de doctorat en Ingénierie pour la santé, cognition et environnement

Sous la direction de Xavier Leverve.

Soutenue en 2004

à l'Université Joseph Fourier (Grenoble) .

    mots clés mots clés


  • Résumé

    Le foie est un organe central dans la régularisation du métabolisme énergétique. En fonction de leur position par rapport à l'axe vasculaire, les hépatocytes s'adaptent à différentes PO2. L'objectif de ce travail était de mettre au point des conditions d'étude des effets de l'hypoxie sur le métabolisme hépatique, en modulant la quantité de cellules périfusées. Les résultats montrent qu'en utilisant deux concentrations d'hépatocytes différentes, une situation d'hypoxie relative pendant toute la durée de l'expérimentation peut être créée. Dans ces conditions, les cellules présentent une activité métabolique significative. Les résultats montrent que la gluconéogenèse est inhibée pour ne pas encore abaisser l'état énergétique de la cellule. De plus, le potentiel rédox, à partir de la dihydroxyacétone, diminue au cours du temps. Il semblerait que la diminution du rapport NADH/NAD+ soit causée par un transfert d'équivalents réduit du NADH vers le NAD(P)H, qui permettrait le fonctionnement de la glutathion péroxydase. La diminution du rapport NADH/NAD est prévenue par l'addition d'octanoate au dihydroxyacétone dans le système. Ce nouveau modèle de périfusion d'hépatocytes est sensible à la moindre variation de PO2, et permet de mesurer des adaptations métaboliques qui laissent présager que ce modèle pourrait permettre l'étude des variations transcriptionnelles dues à l'hypoxie.


  • Pas de résumé disponible.

  • Titre traduit

    Modifications of perifusion technique to studie hypoxia in rat hepatocytes


  • Résumé

    The liver is a central organ in the regulation of energetic metabolism. Its structure makes it sensitive to oxygen variation. The major aim of this work was to investigate the effects of hypoxia on hepatic metabolism, by changing the amount of perifused hepatocytes. The results show that increasing cells in the perifused resulted in a relative hypoxia during the whole experiment. In these conditions, cells display a significant metabolic activity. Such that gluconeogenesis is inhibited to avoid a further decrease in energetic state and glycolysis is not stimulated by hypoxia. Furthemore, in the presence on dihydroxyaceton, we found that the rédox sate diminished progressively during the experiment. It is in hypothesized that the decrease in the NADH/NAD+ might be a transfert of reducing equivalents from NADH to NAD(P)H to ensure glutathione peroxidase action. The NADH/NAD+ decrease can be prevented by additing octanoate to dihydroxyacetone in the system. This new hepatocyte perifusion model sensitive to oxygen variation, allow us to evaluate metabolic adaptations and might be useful to investigate transcriptional variations due to hypoxia.

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Informations

  • Détails : 230 p.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. p. 217-230

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  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire de Sciences.
  • Non disponible pour le PEB
  • Cote : TS04/GRE1/0042
  • Bibliothèque : Service interétablissements de Documentation (Saint-Martin d'Hères, Isère). Bibliothèque universitaire de Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : TS04/GRE1/0042/D
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