Hybridomes de poulet, anticorps synthétiques et anticorps locaux : de la réponse immune intestinale vers l'analyse de banques d'ADNc d'Emeria tenella

par Susana Réfega

Thèse de doctorat en Sciences de la vie et de la matière. Immunologie parasitaire

Sous la direction de Pierre Péry.

Soutenue en 2003

à Paris 5 .


  • Résumé

    Les coccidioses représentent un problème majeur dans les élevages intensifs de volailles. Des anticorps locaux, produits à partir de cultures ex vivio de fragments de caeca suite à une infection par E. Tenella ont été utilisés pour cribler des banques d'ADNc de sporozoïte et de schizonte. Cela a permis l'identification de nouveaux AST (Antigen Sequence Tags) ciblés par la réponse humorale de l'hôte. Nous avons produit des hybridomes de poulet, à partir des lymphocytes des tonsilles caecales. L'anticorps monoclonal G1F5 ainsi obtenu est spécifique d'un antigène présent au stade macrogamonte et oocyste d'E. Tenella. Un anticorps synthétique (scFv) qui conserve les mêmes capacités de reconnaissance antigènique que l'anticorps monoclonal G1F5 a été construit. Nous avons aussi construit une banque de scFv de poulet présenté par phage filamenteux. Ces scFv spécifiques du stade schizonte ont été construits à partir de lymphocytes de tonsilles caecales suite à une infection par E. Tenella.

  • Titre traduit

    Chicken hybridomas, recombinant antibodies and local antibodies : the intestinal immune response thorough the analyses of Eimeria tenella cDNA librairies


  • Résumé

    Coccidiosis is a major protozoan parasitic disease of poultry. The first part of our work consisted on the immmunoscreening of sporozoite and schizont cDNA libraries with local antibodies produced ex vivo from intestinal culture of E. Tenella infected chickens. The use of these intestinal antibodies allowed the identification of new AST (Antigen Sequence Tags) targeted by the natural infected host. We produced chicken hybridomas with B lymphocytes from infected chickens caecal tonsils. One of the clones, G1F5, recognises macrogamont and oocyst antigens. A recombinant antibody (scFv) which exhibited equivalent antigen binding specificity to the monoclonal antibody G1F5 was produced. We constructed a chicken scFv phage display library against E. Tenella using lymphocytes purified from the caecal tonsils of infected animals. The characterisation of this phage display library showed the presence of specific scFv against the schizont stage of the parasite.

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Informations

  • Détails : 203 f.
  • Notes : Publication autorisée par le jury
  • Annexes : Bibliogr. f. 172-203

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  • Bibliothèque : Université Paris Descartes-Bibliothèque Saints-Pères Sciences (Paris). Service commun de la documentation. Bibliothèque Saints-Pères Sciences.
  • Disponible pour le PEB
  • Cote : 2003PA05S005
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